过期 20 年的「祖传试剂」竟然还能用?博士专门发文验证过期了效果也惊人,导师:得亏课题组有囤积癖

2024-08-07 18:02 来源:微信公众号 - ShengWuXueBa 作者:Olaf
字体大小
- | +


实验室有三大惊喜,堪比换季的时候在大衣兜里找到了被遗忘的毛爷爷:

师兄师姐毕业,你继承祖传破盒子、破镊子;

收拾冰箱,捡到一管陈年抗体,竟是你的目标蛋白;

想买新盒,却被告知实验室还有一份陈年试剂盒~

图源:网络

这场继承之战往往会在师兄师姐毕业,或者寒暑假的时候发生。不过师兄师姐传下来的东西,尤其是重要抗体,真的还能继续使用吗?

乔治 · 卡托雷蒂,一位来自意大利的生物学家,用他的研究为我们揭开了这一谜题。


26 岁抗体「老将」,能否准确检测?

意大利生物学家乔治 · 卡托雷蒂(Giorgio Cattoretti)和他的同事们对 38 个在冷藏环境中(4°C)保存了 12 至 26 年的病理学诊断抗体的有效性进行了测试,并发现这些抗体的有效性并没有因为长期搁置而被削弱。

具体研究方法、结果如下:

图源:论文截图

四个独立的实验室测试了一批在 4°C 下保存了 12 至 26 年的诊断抗体。

包括 1986 年的抗角蛋白抗体 AE-1 和 AE-3、1992 年的抗角蛋白抗体、1993 年的抗 PCNA、1993 年的抗胰岛素多克隆抗体、1994 年的抗 LN5、1995 年的抗 MAC387、1996 年的抗弹性酶、1998 年的 HRP 偶联的抗 kappa 轻链、2000 年的抗 LN1 和抗 LN2。

图源:论文截图

受监测的抗体类型包括多克隆和单克隆抗体,可能存在批次、动物或亚克隆的差异。

所有试剂都保存在 4°C,含有抗菌剂、缓冲液和蛋白质稳定剂或培养基。使用未过期的抗体作为对照组进行测试和比较。

图源:网络


老抗体带来 89% 的成功检测

结果不负众望!26 岁高龄的抗体表现出了不错的成绩。

38 个抗体样本中有 34 个能够在常规处理的人组织上成功染色,也就是 89% 的成功检测率,且过期抗体的最佳工作稀释度与它们最初供应时的稀释度相匹配。

结果还显示 ,所有抗体都能染色表达水平广泛的组织抗原,包括一些非常弱的表达。

使用过期抗体得到的结果与使用当前未过期试剂的结果无法区分。以下是多种组织样本使用过期抗体染色的免疫反应性。

图源:论文截图

图表中包括了结肠癌转移到肝脏的样本(AE1 和 AE3 染色)、唾液腺的 EMA 染色、结肠黏膜的细胞角蛋白染色、结肠黏膜下层的肌动蛋白染色、腭扁桃体的 CD34 抗体染色、野生型和突变型 TP53 的染色、CD45 抗体染色的扁桃体组织等。

看来,过期抗体在不同组织和不同抗原上的应用效果都不错。


回归现实,过期试剂仍要谨慎用

但其实,实验归实验,抗体归抗体。这一结果并不能代表全部过期试剂有效。实验室试剂的保质期因其类型和成分的不同而有很大差异。

图源:网络

实验室部分常用试剂的保质期还是非常短的,比如酶通常在 -20°C 或 -80°C 下保存,保质期可能从几个月到几年不等,但活性可能会随时间降低。

血清需要在 -20°C 以下保存,通常保质期为 1—2 年,但长期保存后可能需要检测其效价。

而缓冲液(如 PBS):在 2-8°C 下保存,保质期可能从数月到一年,取决于是否添加防腐剂。

* 备注:具体每种试剂的存储和使用条件应根据制造商提供的具体说明来确定。

最后,还是建议大家定期检查试剂的有效性,并根据实验室标准操作程序(SOPs)来处理和存储这些试剂。

你用过年龄最大的试剂是什么?哪一年的?你拿到理想结果了吗?请在评论区留言吧!


题图来源:Stephen Barnes/Science/Alamy


我们长期为科研用户提供前沿资讯、实验方法、选品推荐等服务,并且组建了 70 多个不同领域的专业交流群,覆盖 PCR、WB、蛋白研究、免疫学实验、细胞实验、类器官、外泌体、肿瘤研究等,定期分享实验干货、文献解读、同行分享等活动。如需进群可以添加实验菌企微哦


编辑: 王凯

版权声明

本网站所有注明“来源:丁香园”的文字、图片和音视频资料,版权均属于丁香园所有,非经授权,任何媒体、网站或个人不得转载,授权转载时须注明“来源:丁香园”。本网所有转载文章系出于传递更多信息之目的,且明确注明来源和作者,不希望被转载的媒体或个人可与我们联系,我们将立即进行删除处理。同时转载内容不代表本站立场。

  • App下载