亲爱的研 0 同学们，welcome to 研究生的学术殿堂！初入实验室可能会被各种标准操作、行业黑话搞得迷迷瞪瞪，甚至有倒霉蛋徒手从液氮里捞细胞，弄坏价值百万的显微镜......
但是别担心，为了帮助你们迅速融入实验室生活，快速避坑。
本文将从实验室行（hei）话、常见入门实验、标准溶液制备、仪器使用与维护、实验室安全知识等 5 个方面，为大家提供一份详尽的实验室基础入门指南。
PART-1 实验室黑话 list
研 1 师姐：每天早晨准备一下「泡椒」 的工具，帮师姐配两块胶，陪师姐跑两圈，下午再帮出差的导师写写本子，下班前插 50 盒枪头，一天的放羊研究生生活就圆满结束啦。
你：？？？？
图源：自己做的
实验室是一个充满专业术语的地方。了解这些「黑话」是融入实验室文化的第一步。
实验类
跑胶：进行凝胶电泳实验，跑 PCR 或者跑 WB。
洗瓶子：清洗实验室的玻璃仪器，初入实验室必备技能
柱子：色谱柱，常用于有机化学实验中的分离纯化。
插枪头：更换移液枪的吸头，是实验室常规操作之一。
P 菌：进行细菌的培养和转化，常见于分子生物学实验。
你p不p？：别生气，人家问你 pcr 吗。
生活类
Push：老板催促你加快工作进度。
搬砖：进行日常的科研工作。
写本子：撰写科研项目申请书或研究计划。
投了/中了：文章投稿或被接收。
Accepted：文章被接受发表。
工资：实验室补助，通常指研究生的补助（600）。
身份类
老板：导师，通常在前加大、小二字以区分级别。
大牛：某一领域的顶尖科研人员。
小牛：正在向大牛奋斗的科研工作者。
青椒：青年教师，高校教师中压力较大的群体。
独立 PI：独立的 Principle Investigator，拥有课题组话事权的导师。
土博：本土博士。
放羊：指的是导师基本不管的放养类研究生，实验全凭自觉
PART-2 基础实验手册
养小鼠 C57、Western Blot (WB)、PCR 在生物医学研究中扮演着至关重要的角色，是实验室最基础的部分，也是研 0 同学们常接触的实验操作，你需要快速掌握！实验名称：养小鼠 C57
图源：自己做的基础操作步骤：定期帮师兄师姐清洁消毒笼具并铺设垫料
- 根据实验需要选择性别、年龄的小鼠并安置
提供饲料和水，建议一周更换 1—2 次
- 观察小鼠行为和健康状况，记录生长数据
如有繁殖实验，记录繁殖数据和后代信息
- 帮师兄师姐配胶（根据实验室的配方表）
- 提取样本蛋白并进行 SDS-PAGE 电泳将蛋白转到膜上
使用封闭液阻断膜上未结合蛋白的部分
- 一抗孵育，特异性识别目标蛋白
清洗去除未结合的一抗
- 二抗孵育，标记一抗
清洗去除未结合的二抗
- 使用 ECL 试剂进行检测并用成像系统捕捉信号
RT-PCR 电泳实验
设计特异性引物（一般使用文献中验证过的）
- 准备 PCR 反应体系（模板 DNA、引物、dNTPs、缓冲液、DNA 聚合酶）
设置 PCR 扩增程序（变性、退火、延伸）
- 进行 PCR 扩增反应
使用凝胶电泳分析 PCR 产物
观察和记录扩增结果
这些步骤是每个实验的基本框架，具体操作时可能还需要根据实验目的和条件进行调整。
后续我们会为大家整理其他高校曾使用过的有效 protocol ，可以作为实验参考。
PART-3 标准溶液配制手册
图源：自己做的
初入实验室，可能会配置 PBS、PBST、TBS、TBST，这也是平时用量最大的几类液体。
它们是许多实验能够顺利进行的关键，也是你立足实验室获得师兄师姐信任的一项技能！以下是详细的配制步骤和单位：
1、PBS (Phosphate Buffered Saline)
用途：细胞培养和洗涤、免疫组织化学染色等。
浓度：1X PBS
体积：1 升
配方：
- NaCl: 8.00 g
- KCl: 0.20 g
- Na2 HPO4（无水）: 1.42 g
- KH2PO4（无水）: 0.24 g
- 加水至 1000 mL
配制步骤：
1. 称量 8.00 克 NaCl、0.20 克 KCl、1.42 克无水 Na2 HPO4 和 0.24 克无水 KH2PO4。
2. 将这些化学物质放入一个 1000 毫升的容量瓶中。
3. 加入足够的去离子水，使溶液体积接近 1000 毫升。
4. 轻轻搅拌，使所有成分完全溶解。
5. 调整溶液体积至 1000 毫升，确保浓度准确。
2、PBST (Phosphate Buffered Saline with Tween 20)
用途：免疫组织化学染色，减少非特异性结合。
浓度：1X PBST
体积：1 升
配方：
- 1X PBS
- Tween 20: 0.1%（最终浓度）
配制步骤：
1. 按照上述 PBS 的配方配制 1X PBS。
2. 向 1000 毫升 PBS 溶液中加入 1 毫升 Tween 20。
3. 轻轻搅拌，使 Tween 20 完全溶解。
3、TBS (Tris Buffered Saline)
用途：细胞培养和洗涤、免疫组织化学染色等。
浓度：1X TBS
体积：1 升
配方：
- Tris (Trizma base): 6.05 g
- NaCl: 8.77 g
- 加水至 1000 mL
- 调节 pH 至 7.4-7.6
配制步骤：
1. 称量 6.05 克 Tris 和 8.77 克 NaCl。
2. 将这些化学物质放入一个 1000 毫升的容量瓶中。
3. 加入足够的去离子水，使溶液体积接近 1000 毫升。
4. 调节 pH 至 7.4-7.6（使用 pH 计和 Tris 或 HCl）。
5. 调整溶液体积至 1000 毫升，确保浓度准确。
4、TBST (Tris Buffered Saline with Tween 20)
用途：免疫组织化学染色，减少非特异性结合。
浓度：1X TBST
体积：1 升
配方：
- 1X TBS
- Tween 20: 0.1%（最终浓度）
配制步骤：
1. 按照上述 TBS 的配方配制 1X TBS。
2. 向 1000 毫升 TBS 溶液中加入 1 毫升 Tween 20。
3. 轻轻搅拌，使 Tween 20 完全溶解。
注意事项：
- 配制溶液时使用去离子水或蒸馏水。
- 溶液配制完成后应检查 pH 值，确保其在所需范围内。
- 储存时应避免污染和光照，以保持溶液的稳定性。
作为新手小白，配液时要戴好口罩、帽子、眼镜，配液后记得收拾好实验台，并在瓶子上标记好配液日期和 pH 值。
PART-4 仪器使用与维护
正确使用和维护实验室仪器，不仅能够延长仪器的使用寿命，也能确保实验数据的准确性和可靠性。
最重要的是不能给师兄师姐们添麻烦～以下是几个初入实验室阶段常用的实验仪器：
图源：自己做的
仪器名称——离心机
使用注意事项：
1. 确保样品配平，避免离心管不对称放置；2. 选择合适的转子和离心条件；3. 离心结束后，缓慢减速至停止（如果是 4 度离心需要恢复室温并将水擦干净）
仪器名称——PCR 仪
使用注意事项：
1. 使用前预热，确保反应温度准确；2. 严格按照 PCR 程序设置参数；3. 使用专用的 PCR 管和耗材；4. 用完收走你的八连管哦
仪器名称——凝胶成像系统
使用注意事项：
1. 使用前检查光源和相机是否正常；2. 确保凝胶平整放置；3. 避免在强光下长时间暴露凝胶；4. 用完收走你的凝胶哦！
仪器名称——显微镜
使用注意事项：1. 使用前调整光源和物镜；2. 避免长时间观察高倍镜下的样品；3. 使用专用的清洁工具清洁物镜和目镜。
PART-5 实验室安全知识最后，安全是实验室工作的重中之重，实验室充满了有毒液体、挥发性液体。大部分试剂均有神经毒性。因此初入实验室一定要了解并遵守实验室安全规则，保护自己和他人的安全。
图源：自己做的安全类别——个人防护1. 穿着合适的实验服，戴好口罩；2. 处理化学品或生物样本时佩戴手套；3. 在可能发生飞溅的情况下佩戴护目镜安全类别——个人防护化学品管理1. 化学品应按照类别和危险性存储；2. 所有化学品容器应有清晰的标签；3. 按照实验室规定处理废弃化学品安全类别——个人防护生物安全1. 了解并遵守所在的实验室生物安全规范；2. 处理生物样本时采取适当防护措施；3. 按照规定处理生物废弃物，禁止乱丢垃圾。安全类别——个人防护紧急情况处理1. 了解实验室内的火灾报警系统和灭火器位置；2. 掌握基本的火灾扑救方法；3. 掌握化学品泄漏的应急处理方法。除了以上常规安全知识外，还要特别注意实验室的水浴锅、高压锅以及液氮罐。看好水位警戒线，不要随意伸手触碰，心存敬畏才能更安全地做好实验～初入实验室的你，还有哪些困惑、不解？欢迎追更本系列干货专栏 #研 0 入门指南#。接下来学霸君将继续为大家整理论文检索方法、提前进组的注意事项等内容。也欢迎大家在评论区留言告诉学霸君你想看的内容哦~我们长期为科研用户提供前沿资讯、实验方法、选品推荐等服务，并且组建了 70 多个不同领域的专业交流群，覆盖 PCR、WB、蛋白研究、免疫学实验、细胞实验、类器官、外泌体、肿瘤研究等，定期分享实验干货、文献解读、同行分享等活动。如需进群可以添加实验菌企微哦
