IHC、ELISA、WB,是免疫学三大常用工具,分别用于蛋白质的定位,定性和定量分析。我们整理了这三者之间的区别、使用场景,文末还有 wb 试用产品推荐~
「研选干货」
IHC、ELISA、WB 选择要点
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图源:自制
IHC
原理:融合了免疫学原理(抗原抗体特异性结合)和组织学技术(组织的取材、固定、包埋、切片、脱蜡、水化等)。定位:通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色,来对组织、细胞内抗原进行定位、定性及定量的研究,主要是定位。样品:细胞或组织,要在显微镜下观察结果,可能出现膜阳性、质阳性和核阳性。ELISA
原理:免疫学原理和化学反应显色,可以用做精准定量。
样品:多是血清、血浆、尿液、细胞或组织培养上清液,没有用到组织包埋、切片等技术,这是与 IHC 的主要区别。
实操:需要将抗原或抗体结合到固相载体表面,从而使后来形成的抗原-抗体-酶-底物复合物粘附在载体上,这就是「吸附」的含义。
原理:先要进行 SDS-PAGE,然后将分离开的蛋白质样品用电转仪转移到固相载体上,而后利用抗原-抗体-标记物显色来检测样品,可以用于定性和半定量。
样品:细胞、蛋白。
「研选推荐」
0 元试用产品清单
● 更快捷:采用上层胶和下层胶的预混配方,只需将试剂两两混合,加入促凝剂即可凝胶,配胶过程中无需添加TEMED。
● 更稳定:提供的改良型促凝剂 APS,稳定性和促凝效果更好。
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彩色预染 Marker(8-180kDa)
● 使用预染的 Marker 可以动态观察蛋白电泳状态和转膜效果,及时发现异常,把控实验结果。
● 更方便:本产品已经配制在上样缓冲液中,可直接上样使用,无需煮沸、稀释、加入还原剂处理。
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WB 即用型快速封闭液
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内容策划|汪颖内容审核|vic题图来源|Daisy
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