实验室是一个巨大的盲盒。
对于刚接触科研的同学们,诡异结果图真的遍地开花!有的在培养皿里培养出乌龟、有的养出鬼脸,还有人跑 WB 能跑出山水画。相比之下,科研老司机们的实验结果图真的非常丝滑,专治各种不服!今天学霸君带大家盘点下 WB、PCR、细胞实验中的高手和菜鸟,你会在哪个 level?
Round-1 漂亮的 WB 图究竟长啥样?
欢迎光临 WB 菜鸟村
WB 是实验室的第一道门槛,都说 WB 是玄学,充满未知,结果图千变万化,但是你见过山水画一般的 WB 结果图吗?胶不混匀,电压过大的下场就是这样~
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小红书 @ 不开心
还有部分科研小白 WB 转膜总是控制不住温度,拍照又加了过多的曝光液,结果曝光时不仅膜上脏乱差!背景都能勾勒出一棵大树!
小红书 @ 听雾轻吟
看看 WB 老司机的图
不过,到底什么样的结果才算好的实验结果啊?最近小红书一位科研大神发出漂亮的电泳图 ——loading 出方块的电泳,除了经验和运气也需要靠仪器设备的加持~
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科研高手们除了电泳时稳得不行,曝光时的条带也依旧很给力!
大神分析出了个人经验 —— 制胶时在涡旋仪上振一会,颠倒一下试管,然后再振,这样更能充分混匀;下层胶放久一些,放五十分钟;电压先 80V 30 min 再 100V 60 min 转膜的时候,切记 PVDF 膜在转膜液里可以放久一些,放四分钟哦~
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小红书 @ 南一
Round-2 实验高低手们的 PCR
如果 WB 是第一道门槛,PCR 就是进阶必备实验,从蛋白表型过渡到分子机制,考验了一个科研人的稳定、耐力、敏捷度等全方面能力。qPCR 曲线经常乱成一团、RT-PCR 电泳图总是拖尾或者消失,结果图一言难尽。
新手 PCR,一看一个不吱声
照着说明书,坎坎坷坷地摸索,失败了 N 多次,也不知道失败原因在哪里,终于再一次对着说明书一字一句地理解,原来是 cDNA 浓度太高了。
小红书 @ 小白
PCR 结果跟诈骗一样,一样的引物、DNA、酶、PCR 的程序、体系,结果差距这么大?!做了半年,感觉白做了,数据都不敢用了。
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小红书 @ 凡凡
老手 PCR,硬控 10 分钟
再来看一块顶级琼脂糖琼胶电泳结果,背景清晰不拖尾,120v 30 min 结合一点手稳与运气,即可收获完美凝胶图,及时更换 TAE 电泳液也是另一个小 tip 哦!
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小红书 @ 凡矿泉水与亮晶晶
看完 RT-PCR ,最后来看看教科书级别的 qPCR 曲线。
其实造成 qPCR 实验重复性差的原因主要是加样不准确。这种情况下,可以更换性能更好的移液枪,将模板做高倍稀释,以大体积加入反应体系,最后加样的时候可只用一档,也能提升结果图美观度。
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小红书 @ 还能学的丘丘
Round-3 细胞实验大 PK
看完 WB、PCR 就进入第三轮大 PK 了!培养皿是一个好地方,拥有合适的 PH、适宜的温度,以及各种养分,这会使结果的差异化变得更大。
细胞间新人们的作品一览
除了能养出细胞系、原代细胞外,刚进入实验室的新手科研人,还可能会养出来各种细菌、乌龟、鬼脸.......
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小红书 @ 天才少女与非常好先生
做免疫荧光,好不容易约到激光共聚焦,在小黑屋拍照时,发现细胞都变成了带大气泡的鬼脸。
立刻换了个颜色,结果又拍到一只!
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小红书 @ 甜面酱的新天地
来吸高手养的绝美细胞吧
看到这里还不快洗洗眼睛,瞧瞧实验高手养的细胞到底什么样?
BSA:DMEM(1:9) +1% 的双抗,结合合适的传代比例(刚复苏 1:2 传代,细胞状态好就换成 1:3/1:4,需要较多细胞的时候 1:5/6)。
这样下来不爱贴壁的神经元也能做到个个贴壁、颗颗饱满。高手做免疫荧光,也是颗颗分明,定位准确。
据说用 PBS 漂洗爬片上的细胞 2 次,每次 3 min;加入 4% 多聚甲醛没过细胞,室温固定 20 min;后用 PBS 漂洗 3 次,每次 3 min;再加入 Triton X-100 没过细胞,室温通透 20 min,通透完成后,PBS 漂洗 3 次,每次 3 min;加入山羊血清封闭 1 h,封闭后不漂洗,依次孵育一抗二抗,漂亮结果就轻松拿到啦!
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小红书 @ 拯救 WB 行动
看来科研新手们意外实验结果突然降临,是粗心大意的后果。
今天,学霸君就给大家罗列了 3 点超实用的实验建议,帮助各位新手提升实验结果的美观度。
1、充分准备与规划:在实验开始前,彻底阅读并理解实验指南或规程,明确实验目的、步骤、所需材料及潜在风险;
制定详细的实验计划,包括所有预期的操作顺序;确保所有实验器材已校准并处于良好工作状态,试剂和溶液新鲜有效,标签清晰无误。
2、遵守安全规范与操作流程:实验过程中,不要随意离开正在进行的实验,时刻监控实验状态,及时调整或中断实验以防失控。
3、细致观察与准确记录:实验中保持高度的警觉性和观察力,注意任何异常现象,如不寻常的颜色变化、气体释放、温度波动等。
实时、准确记录实验数据和观察结果,包括实验条件、所用试剂量、反应时间及任何意外情况。
通过这样的综合策略,可以显著降低实验中的不确定性,提高实验的成功率,并保障实验者的安全哦~
最后,你有没有 get 过意外实验结果,他们都长什么样?欢迎分享你的实验结果图到【生物学霸后台】,有机会我们再拿出来跟大家分享哦!