手抖也能划出笔直细胞划痕?超实用「插件」免费试用

2024-03-12 18:05 来源:微信公众号 - ShengWuXueBa 作者:生物学霸
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科研是一个考验综合能力的「活儿」。从课题设计,到手工操作再到数据分析、绘画制图、演讲发表、文章写作,每一个环节都要我们样样精通。














细胞划痕实验作为最重要的细胞功能实验之一,主要用来检测和研究细胞的迁移(motility)和侵袭(invasion)能力,广泛应用于肿瘤学胚胎发育及组织工程等多个生物学和医学领域。而常见的细胞划痕不均一、染色后细胞分布不均等问题,往往成了整个实验的「致命伤」



细胞划痕实验「小助手」--Ibidi 细胞划痕插件,弥补传统实验方法的不足,简化实验操作,不再担心手抖问题。只需待细胞长满后轻轻一揭,即可获得边缘整齐、宽度均一的细胞划痕。


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附上高效实操 protocol 


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高效进行细胞划痕实验,get 全新 protocol


在获得以上工具后,我们可以按照全新 protocol 进行划痕实验,不再担心因为手不稳带来的实验误差,一次就能收获漂亮 figure 图。


1. 制备细胞悬液,800~1,000 rpm 离心 3 min 除去死细胞和细胞碎片。用无细胞培养基或磷酸盐缓冲液将细胞悬液调节至合适细胞浓度,建议细胞浓度为 3 × 105 cells/mL。


2. 在二孔细胞划痕插件的每个孔中加入 70 μL 已调节浓度的细胞悬液,加液过程中应避免晃动培养皿,以防细胞分布不均。



3. 将细胞在 37 ℃ 和 5% CO2 条件下孵育至少 24 h。


4. 待细胞长满后,用灭菌镊子夹住细胞划痕插件的一角将其移除。



5. 在 35 mm 培养皿内加入 2 mL 新鲜培养基。 


6. 放于倒置显微镜载物台上,以 4 倍~20 倍物镜采集初始图片,并按实验节点设置在细胞划痕的同一位置采集图片。



Ibidi 细胞划痕插件,划出笔直划痕


优势一,精确控制间隙距离:在传统的划痕分析中,手动操作往往导致间隙距离不一致,划痕也不够笔直。为了解决这一问题,ibidi 的细胞划痕插件中设定了 500 微米的人造间隙,确保每次实验的起始距离保持一致,且划痕笔直。



优势二,让细胞边缘清晰无浮动:手动划痕容易产生未完全去除的自由浮动细胞,这可能影响细胞的迁移率。ibidi 的细胞培养插件设计为可移除式,可以确保边缘干净且笔直,避免了自由浮动细胞的问题。


优势三,减少细胞使用量:传统的划痕检测方法需要一层汇合的细胞,如果实验需要进行多种条件下的重复对照实验,将需要大量细胞。ibidi 的细胞培养插件通过将每孔中的细胞生长面积减少到 0.22 平方厘,从而减少对珍贵或昂贵细胞的需求,大大节约实验成本,提高实验的可行性。


优势四,盖玻片底皿增强成像效果:传统的划痕分析通常在多孔板中进行,底部厚且只能进行明场成像和间隙距离的量化。ibidi 的细胞培养插件采用经过 ibiTreat 组织培养处理和灭菌的盖玻片底部,支持明场和免疫荧光成像。这使得观察细胞骨架、细胞粘附形态、核形态等结构成为可能,增加了单个实验的数据量,降低了成本和试剂消耗。


优势五,ibidi 的细胞培养插件还可做单个实验完成独立操作:由于「边缘效应」,往往多孔板的外周孔蒸发较多可能导致条件不一致,影响实验结果。而ibidi 的细胞培养插件独立包装,适用于单次实验,有效避免了「边缘效应」并确保数据的一致性。此外,培养皿设计有盖子锁定功能,以确保在处理时盖子始终保持打开状态。


看到这里还不心动吗?致力于解决传统细胞迁移实验中普遍存在的操作难题与精准度瓶颈,ibidi 细胞划痕插件具五大核心优势,完美提升实验过程的精确性、可重复性和效率。限时免费试用,立即申请吧!



内容策划:潘成
内容审核:朱卿

图片来源:科适特

题图来源:科适特


参考文献

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[3]. Kawabata, T., Otsuka, T., Fujita, K., Sakai, G., Matsushima‑Nishiwaki, R., Kozawa, O., Tokuda, H."(-)-Epigallocatechin gallate but not chlorogenic acid suppresses EGF-stimulated migration of osteoblasts via attenuation of p38 MAPK activity". International Journal of Molecular Medicine 42, no. 6 (2018): 3149-3156. https://doi.org/10.3892/ijmm.2018.3884



编辑: 王凯

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