师弟
这周做的 siRNA 转染，转完的细胞过了一晚全飘了，颗粒无收啊
！
最近做转染手气都不行，我上周做的转染效率低得可怜，实属难姐难弟了！晚上我们加班复盘下近期的实验，看看哪里出了问题
师姐
细胞转染实验其实并没想象中简单，快来看看我们难姐难弟彻夜复盘总结出来的硬核干货，一起查缺补漏，提高转染效率吧！（文末有转染试剂试用，真实用户反馈优质使用体验）
决定细胞转染效率的主要因素
1. 细胞因素
细胞类型不同，转染效率也会有所差异。一般来说最容易培养和转染的是 HEK-293 细胞系，此外，贴壁细胞比悬浮细胞容易转染；增殖速度快的细胞比处于静止期的细胞容易转染；细胞系比原代细胞更易转染。
细胞密度也会影响转染效率。不同的转染试剂或者细胞类型，要求转染时的最适细胞密度各不相同。一般当细胞密度达到 60%～80% 时进行转染可以取得较高的转染效率，过低或过高都会影响转染效果。
细胞状态也非常关键，应尽量使用适度传代的细胞系，培养过程中一定要避免细菌，支原体或真菌的污染。
2. 转染载体
转染载体的大小、质量和用量也会影响转染效率，对于不同大小的载体需要优化不同的实验参数或用量，需要对质粒的浓度、纯度和构象、RNA 是否降解等进行严格的质量把控。
3. 转染试剂
转染试剂毒性太大，会抑制细胞正常生长，甚至导致大量细胞死亡。因此，应优先选用温和且毒性较低的转染试剂。不同试剂对细胞的要求不同，使用转染试剂的时候一定要看说明书。
以上干货是否帮到你了呢？我们还要送上一份大礼给大家— Umibio 转染试剂 LipoP30 开启免费领用通道了，它拥有明显的优势：
1
卓越的转染效率，针对最广泛类型的难转染细胞，可将效率提升 3～10 倍；
2
作用温和，细胞毒性低，可改善细胞活力；
3
高性价比，同时实现非常好的转染效果。
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实验方法一同附上！
具体实验方法
注：每次转染前需进行预实验，以摸索最佳条件，尤其是转染试剂的最佳用量。以下以 DNA 为例，siRNA、mimics 等其他核酸操作相同。
1
接种细胞至 70～90% 汇合度时转染。对大多数细胞来说，转染时高细胞密度可以得到 较高的转染效率，并能减少细胞毒性；
2
使用 Opti-MEM 培养基稀释 LipoP30-B 试剂（建议设置 2 个梯度），充分混匀；
3
使用 Opti-MEM 培养基稀释 DNA，制备 DNA 预混液，然后添加 LipoP30-A 试剂， 充分混匀；
4
在每管已稀释的 LipoP30-B 试剂中加入第 3 步中稀释的 DNA 混合液（1:1 比例）；
5
室温孵育 5～15 分钟；
6
加入 DNA-脂质体复合物至细胞中；
7
37 ℃ 孵育细胞 2～4 天，然后分析转染细胞。
注：对部分敏感细胞，建议转染 6～8 小时后更换新培养基，以降低细胞毒性
操作步骤表
这款试剂真的这么好用么，我们用真实的实验数据说话！
与同类型产品的对比数据
➤ 实验目的：
通过不同品牌的转染试剂，将 1 ug 的绿色荧光质粒转染入不同的细胞中，48 小时后观察细胞中荧光表达情况。
➤ 实验分组：
国际 R 品牌组 （1 ug DNA 对应 1.5 uL 转染试剂）
Umibio 组（1 ug DNA 对应 1.0 uL 转染试剂）
➤ 实验结果
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➤ 实验小结：
在 9 种不同的细胞系上使用了相同质量的绿色荧光蛋白表达质粒。Umibio 的 LipoP30 的转染试剂的效价不亚于国际 R 品牌的转染试剂，在个别细胞系上的转染能力更胜一筹。
用户试用反馈结果
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内容策划：王丹琦
内容审核：吴军
题图来源：图虫创意