师兄，我用共聚焦显微镜拍摄细胞和组织图片时，荧光特别弱，有时候还会出现光串扰和自发性荧光，好不容易解决荧光问题了，可图像拍摄模糊，细节不到位。
很多细胞和组织会自发荧光的，你需要提前识别避免，如果观察的是微弱荧光信号的样品，可以使用能够汇聚更多光线的高数值孔径物镜。针对你的图像质量差，你可以使用浸没油代替空气作为成像介质可以将图像分辨率提高大约 1.5 倍。这里有一份显微镜使用宝典，你可以对照着针对性地改进。
显微镜的使用看似简单，实则暗藏玄机，很多人低估了显微镜的使用技巧和细节，辛辛苦苦地制备样品，却因技术受限，获取不到足够的实验信息，从而竹篮打水一场空。
丁香实验联合 Evident 定制「显微成像实验技巧宝典」，建议使用显微镜的大家人手一本！里面有 3 大显微镜实操视频、5 大板块实验方法和干货以及显微镜高阶使用的经典文献。现在参与活动，即可免费领取实体手册，还有机会获得独家定制显微镜模型或胸针。
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1. 活动时间：即日起至 2024 年 3 月 14 日；
2. 如已参加活动，可在扫码后台回复【继续】填写手册收货地址；
3. 发现问卷内容乱填、错误等内容，则默认放弃（每人或每个手机号限领 1 本）；
4. 实物奖品获奖名单，由 Evident 筛选决定；
5. 奖品图仅供参考，如指定礼品派送完 Evident 有权决定用等值的其他礼品代替；
6. 实体手册及实物奖品，将在活动结束后 10 个工作日内寄出；
7. 本次活动严格保守隐私信息，请放心填写。
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Q：利用显微镜相机实现荧光最佳成像效果的方法和步骤？
A：
1
确定观察倍率。
2
调整标本的对焦，找到待测区域。建议进行自动显示调节。在不观看实时图像或拍照时，请始终关闭荧光光闸。
3
设定用于图像采集的相机参数（如，分辨率、曝光时间）。
4
尝试使用尽可能弱的激发光并延长曝光时间，直到信号高于背景噪声为止。
5
如果曝光时间过长，则逐步增强激发光。
6
检查直方图确认信号没有过饱和。
除了以上简洁的 QA，宝典中还会详细介绍如何选择合适的显微镜物镜、短时间获得更长活细胞成像的 4 个技巧、样品自发荧光的生物学分析、利用显微镜相机实现荧光最佳成像效果的详细方法，如何利用共聚焦显微镜技术获取高质量实验结果，发表高分论文，带你临摹高分论文的科研思路，干货满满。
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内容策划：潘成
内容审核：朱卿
题图来源：图虫创意