实验室真是个熬人的地方,细胞状态差、实验结果不好的日子里,压力大到经常引发「暴饮暴食」。皮质醇的持续分泌,让胃酸分泌更多,食欲也会随之增加……
最近师弟被细胞培养折磨得苦不堪言,日积月累因「过劳肥」而大变样,和刚入学时的他简直「胖」若两人。

师弟

复苏、换液时真的很容易污染,一个实验做三轮都没结果;好不容易快收样本,晚了半天细胞就飘了......
555 除了吃,真的不知道怎么办啊!
要是有进口培养基可能就好了,导!让我买个吧~
停!细胞状态不好真的不怪培养基,也有可能是移液操作时让细胞的环境变得不稳定。以下这些移液误操作,你肯定遇到过。


导师
避免误操作,细胞养得「白胖」
移液器在日常使用中的应用率高,在使用中会出现如滴液,漏吸,吸不准等常见问题。遇到这些情况的时候,可能会直接带来液体污染,或者影响细胞正常状态,通过外力让细胞「漂浮」起来,造成死亡的假象。以下 5 个移液器操作问题与技巧快收下!(文末有福利哦~)

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那么如何有效解决实验过程中的移液问题?
先试试电动助吸器,或许能有意外惊喜
如果你选择用电动助吸器搭配无菌移液管,适合进行中等工作量的细胞培养操作,例如在 6 孔、12 孔和 24 孔细胞培养板里对细胞进行的换液、传代、诱导加药等。还可以对培养基和细胞悬液进行分液。电动助吸器可以有效控制液体的吸取和排出速度,对贴壁状态下的细胞非常温和友好。
但是电动助吸器的使用比较考验手法,一旦吸液速度过快很容易发生「倒吸」,造成吸不上液体,更糟糕的是可能会污染样品。所以一定要记得缓慢吸液,勤换滤膜。
实验证明,瓶口分液器可以让细胞培养更快、更便捷
瓶口分液器其实很常见,它能直接从试剂瓶里准确移取液体,比较适合中高体积的液体分配,操作简单快捷,又可以整支灭菌!那么瓶口分液器可以用来分装细胞悬液吗?这一次,我们用实验数据来回答——可以!
1、细胞传代轻松拿下
在细胞传代的过程中,同时选择用移液器和 BRAND Dispensette® S 瓶口分液器来分配细胞悬液,之后每天消化并统计细胞的数量或活性,未发现用Dispensette® S 瓶口分液器分配传代的 CHO 细胞生长情况与用移液器分配传代的 CHO 细胞生长情况存在显著差异(如图 1 和图 2)。

图 1. 用移液器传代的 CHO 细胞生长情况

图 2. 用 BRAND Dispensette® S 瓶口分液器传代的 CHO 细胞生长情况
2、稳定处理细胞冻存复苏
把 CHO 细胞消化后用细胞冻存液重悬,分别用移液器和 BRAND Dispensette® S 瓶口分液器分配这些细胞冻存悬液并冻存细胞。数日后将上述两种方式冻存的细胞重新复苏,每 2~3 天传代并计数,在 11 代以内未发现用移液器和 Dispensette® S 瓶口分液器冻存的 CHO 细胞在传代和生长上的显著差异(如图 3 和图 4)。

图 3. 用移液器冻存的 CHO 细胞复苏后生长情况

图 4. 用 BRAND Dispensette® S 瓶口分液器冻存的 CHO 细胞复苏后生长情况
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结果显示,BRAND Dispensette® S瓶口分液器适用于 CHO 细胞的传代和冻存过程中的细胞悬液分配而不影响 CHO 细胞的生长。注:由于不同细胞的特性和培养条件不同,应用前请进行实验验证。
BRAND Dispensette® S 瓶口分液器系列可分为普通型、有机型和痕量分析型,移液体积范围可达 0.1~100 mL,适用于实验室中多种常见的试剂分配。其中普通型和有机型可以在 121℃ 整支灭菌,不用担心细胞污染。


BRAND 移液产品福利来袭
细胞培养实验中移液操作至关重要,选择质量稳定、品质优异的移液类产品,能够让你在实验中获得更高效、更安心的体验。现在正值 BRAND 移液产品大促活动!买移液器、电动助吸器、瓶口分液器就送进口蓝盖采样瓶、盒装吸头、封口膜等福利,现点击「阅读原文」快来看看哪款适合你!
内容策划:邹礼平
内容审核:吴军
题图来源:图虫创意

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