我的怨种师弟:用高价买到了假的试剂盒(附避雷技巧)

2023-12-06 17:33 来源:微信公众号 - ShengWuXueBa 作者:生物学霸
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师弟最近脸是真的黑。为了给导师省钱,找了最便宜的 ELISA 试剂盒,想放心大胆多测几个指标。但实验结果诡异,不同浓度的样本数据都大差不差,被导师判定为假货。想省没省,花了更多


于是师弟开始怀疑自己,本着便宜没好货的思路,试剂挑贵的买应该就对了。结果试剂商不给折扣,个别试剂真假混卖,师弟心碎一地,直接拉黑,再也不见

 

有些假试剂无从分辨,用了许久才能发现,造成科研时间和经费的浪费无法衡量。


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3 步让假冒伪劣 ELISA 试剂盒无处遁形!



第一步,先上品牌官网


查 ELISA 试剂盒的种类、数量:种类有大几千甚至上万种,谨慎购买!很可能都是一水假货;


● 查说明书:样本稀释液和标准品稀释液不是同一个的、实验时直接让稀释多少倍去做的,谨慎购买;


● 查操作步骤:如果标准品孔不加抗体,但是样本孔加抗体,这种也建议再三考虑是否购买;


● 查相关文献:试剂盒的页面会介绍被引文献,这点可以重点关注。


第二步,收到试剂盒时仔细检查


● 查试剂盒外标签的产品货号及批次号;


● 查各试剂是否齐全以及是否漏液;


● 进行预实验,看实际表现。


第三步,一次购买同家公司多个 ELISA 试剂盒,可交叉试验进行鉴别。


假冒伪劣 ELISA 试剂盒甄别案例


案例一:


某老师购买了某公司的两个 ELISA 试剂盒,指标为 R.OVA-sIgE 和 R.IL-5,样本为大鼠血清和肺泡灌洗液。实验一开始,问题就不断出现:


(上下滑动查看)

问题一:不同稀释倍数下的结果雷同


预实验结果如下:


图 1:黄色标记部分为 1:1 做的结果,橙色部分为 1:10 做的结果

 

问题二:奇怪的的 O.D 值


从正实验结果分析,样本 O.D 值都在 0.2 左右,基本上都在标曲的 E、F 两个孔之间。


图 2:R.OVA-sIgE 正实验


图 3:R.IL-5 正实验

注:绿色部分为血清数据,蓝色部分为肺泡灌洗液数据。

 

问题三:生物素化抗体只在样本孔添加,但结果是所有孔都有颜色变化


按照试剂盒说明书的步骤,这两个试剂盒都是标准品孔加 50 µL 稀释好的标准品,样本孔加 40 µL 样本 + 10 µL 生物素化抗体(注意标准品孔是不加生物素化抗体的),所有孔加入 50 µL 的酶结合物,然后孵育完洗板加显色液。但结果是所有孔都有颜色变化,发生了灵异事件?

 

总结:除了试剂盒问题,实在不清楚这三个问题该如何解释。

案例二:


某老师购买某公司的人的 β-Endorphin Elisa 试剂盒,样本为人的血清,实验开始后也是问题不断:


(上下滑动查看)

问题一:纯样本稀释液测得的值过高(图 4 蓝框)


图 4:测量结果

 

问题二:不靠谱的说明书和雷同的实验结果


按照说明书的步骤,样本孔加入 10 µL 样本,需要再加入 40 µL 样本稀释液,把样本稀释 5 倍去做。这个方法本身就有错误,不同的样本蛋白含量差异很大,需要预实验后才能确定最佳稀释比例。同时该试剂盒不管遇到那种样品浓度,测量结果都很雷同(图 4 红色框)。

 

问题三:产品没有合规「身份信息」


这两个试剂盒都没有批次号,一般正规的 ELISA 试剂盒厂家每个 ELISA 试剂盒都是有批次号的。


写在最后:

 

科研本是纯粹和神圣的,珍贵的样本、努力的心血不应该被假 ELISA 试剂盒破坏,甚至导致论文出现错误,带来不可承受之痛!博士德希望以此文帮助大家擦亮眼睛,知假识假拒假,还科研一片蓝天!同时也欢迎大家积极参与「博士德 ELISA 打假」有奖征文活动,诚邀广大科研用户一同倡导维护 ELISA 试剂盒的国产品牌形象。



博士德  ELISA 真金不怕火炼
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内容策划:王丹琦
内容审核:朱超敏

题图来源:图虫创意

编辑: 王凯

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