很多细胞实验新手被安排难养的细胞时，容易出现各种问题，包括染菌、细胞复苏后不贴壁、细胞成团等等，网友们分享的失败原因也是五花八门：
小帅
前段时间养的细胞一直变形，更换培养基和血清，重新复苏细胞都没用。最后测了一下培养箱温度，发现显示 37℃ 实际 42℃，校准温度后细胞就恢复正常了。
小美
去年我养细胞死了一大批，实验室其他同学都挺顺利的，应该不是培养基或者仪器的问题。排查原因后，发现是操作过程中 pbs 瓶子加太满了，灭菌完又污染了......
大壮
有段时间我们实验室养细胞老失败，后来销售来实验室道歉了，说有一批血清有问题，他们当时赔了一批。
影响细胞培养好坏的因素众多，在细胞培养体系中，血清是唯一不属于人工合成的成分，不确定因素较大。因此，选择合适的血清是细胞培养成功与否的决定性因素之一。由于胎牛从未接触外界，血清中抗体、补体等对细胞有害的成分含量较新生牛、小牛少，因此细胞培养一般使用胎牛血清。
尤其在培养神经干细胞、内皮细胞和进行基因敲除细胞实验时，对胎牛血清中内毒素应格外留意筛选。内毒素含量越低的血清，级别就越高，以胎牛血清为例：当血清中内毒素含量 ≤ 10 U/ml 时，为特级胎牛血清。在培养娇弱细胞时，应充分了解细胞特点，包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型，选择合适的血清，就像了解育儿知识，为孩子挑选适合的奶粉。保险起见，有试用装在这种情况下是更好的选择。
另外，不管买的昂贵细胞还是惠赠的细胞，刚拿到手赶紧做两件事：检测是否有支原体污染；迅速扩增冻存。
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