类器官,培养迅速、模拟人体微环境,越来越频繁地出现在各大期刊上,甚至有人说,它将取代大部分的动物实验。
Nature protocols 曾整理人类多能干细胞(hPSCs)来源的人肺类器官培养方案;也曾整理了 hPSCs 细胞来源的肠类器官培养方案。
Nature Biotechnology 也曾推荐人类胚胎干细胞(human ESCs)来源的心脏类器官用于科学研究。
如此热门的类器官培养究竟应该怎么做?你所研究的领域有匹配的类器官吗?别担心!丁香实验联合近岸蛋白定制「类器官培养与应用实验宝典」,建议养类器官的大家人手一本!里面有 9 大 protocol、50 个常见 QA、12 篇经验图文,几乎覆盖全部人体系统。现在参与活动,就能免费领实体手册哦~
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Q
鉴定类器官的方法有哪些?
A
初步可以通过显微镜和 H&E 染色观察形态;然后可以用 Western Blot、qRT-PCR、免疫荧光、流式细胞术检测该类器官是否表达相应的 biomarker;基因测序可以鉴定所培养的类器官是否有某些特征丢失;对于部分类器官,还可以检测其是否具有功能,例如:已有研究检测出胃类器官可以分泌胃酸,心脏类器官可以自主跳动。
Q
类器官建立是否成功有怎样的标准吗?
A
➣ 判断形态。显微镜下类器官形态可能为空泡状、出芽状、紧密型、松散型等,但整体形态一致。
➣ 可以鉴定相应的 biomarker 是否有表达,及分布是否与组织切片相似。
➣ 是否能够传代 3 次以上,并可以冻存复苏。
➣ 如果有条件的话,可以进行测序分析。
除了以上 QA,宝典中还会详细介绍肺类器官、心脏类器官、血管类器官、脑类器官、卵巢癌类器官、肝类器官、结直肠类器官、垂体瘤类器官、肾类器官、胰岛类器官、胃类器官的培养与应用,带你临摹高分论文的科研思路,干货满满。
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内容策划:邹礼平
内容审核:朱晓芳
题图来源:图虫创意