师妹
开学第一个实验就跪了，提 RNA 次次失败，怎么进行后续实验
！
别慌，我帮你分析一下具体问题，筛查好原因，各个击破，高质量 RNA 轻轻松松。
师兄
<<<以下列有问题一、二，往左滑动，查看更多 >>>
问题一：RNA 纯度异常
可能原因：
（1）蛋白残留；
（2）样品匀浆化时所加的试剂量太少；
（3）匀浆化后样品没有在室温下放置 5 min；
（4）分离的水样层中污染有苯酚层；
（5）RNA 没有完全溶解。
解决方法：
（1）OD260/OD280 值偏低时，表明蛋白残留严重，考虑一开始样本量是否过多，可以降低样本量或者增加裂解液的量；
（2）样品匀浆化时加入足量的裂解试剂；
（3）匀浆化后样品在室温下放置 5 min；
（4）分离的水样层中杂含苯酚层，可加入氯仿把水相里参与的苯酚抽提掉；
（5）RNA 未完全溶解；最后步骤，需要简单干燥 RNA 沉淀（空气干燥或真空干燥 5～10 分钟），不要在真空管里离心干燥。
问题二：提取的 RNA 浓度很低
可能原因：
（1）样本收集或者保存方法不准确；
（2）样本前处理不当或者裂解不充分；
（3）细胞在用胰酶处理时过度，消化面分散。
解决方法：
（1）样本收集时动作要快且立马放进液氮或者 -80℃ 冰箱保存，期间不能反复冻融；
（2）保证细胞裂解充分，组织样本匀浆或者液氮研磨充分；
（3）细胞在用胰酶处理时时间不宜太长。
RNA 提取效率一直是新生实验操作的老大难，感激在崩溃时刻，救我狗命的 EZBioscience® RNA 提取试剂盒，8 分钟就把 RNA 提取出来了。用 Nanodrop 一测，纯度、浓度都很好。
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产品特点：
● 简单、快速：最少 8 分钟即可获得高质量的 RNA；
● 纯度高：A260/280 和 A260/230 基本在 2.0 左右，能充分保证 qPCR 实验结果的准确性和可重复性；
● 安全无毒：不含苯酚等，无需氯仿、异丙醇、DEPC 水等致癌物质，对身体无害；
● 基因组充分去除：配有 DNA 清除试剂，可有效去除 DNA 污染；
● 所需样品少：最低可提取 5 万细胞或者 5 mg 组织的 RNA。
实验流程图
使用本产品提取 RNA 的实验结果：
目前正在使用 EZBioscience® RNA 提取试剂盒的单位：中科院上海生化细胞所、复旦大学、上海交通大学、浙江大学、中山大学等高校研究所。
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内容策划：王丹琦
内容审核：钟可可
题图来源：站酷海洛
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