「类器官」怎么算富养? Nature 子刊提示:重视一个关键因素

2023-08-26 19:34 来源:微信公众号 - ShengWuXueBa 作者:生物学霸
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类器官实验越来越热门,很多科研人认为「未来十年,类器官技术可能会广泛取代小鼠实验」。由于建立类器官培养物的实验考虑因素太多:细胞本身、可溶性因子、基质和物理信号等等,导致很多同学的实验都以失败告终,甚至有些同学开始跟随「网梗」,吐槽起来:



类器官在,不远行,远行必「冻上」。

现在努力实验,老了类器官给我「养老」。



穷养 or 富养?穷养类器官,它一定会告诉你便宜没好货!


2022 年底,来自中国和新加坡的研究团队在《Nature reviews methods primers》上发表了题为「Organoids」的文章[1],讨论了生成稳定类器官的关键因素。其中,基质的「好坏」起到了决定性作用。

 

基质胶指一种从小鼠肿瘤中提取出的基底膜基质,主要包含层粘连蛋白、IV 型胶原蛋白、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖等[2],是用于体外模拟细胞真实生长环境的重要生物试剂。

 

镁伽生物基质胶(Extragel)来源于富含胞外基质蛋白的小鼠肿瘤组织,除上述主要成分外,同时还包含多种生长因子[3],例如表皮生长因子 EFG、血小板衍生生长因子 PDGF、神经生长因子 NGF、碱性成纤维细胞生长因子 FGF-2、乙型转化生长因子 TGF-beta 和胰岛素样生长因子 ILGF 等。这种对细胞的富养模式具有良好的稳定性和实用性,广泛应用于细胞生长和分化、代谢/毒理学研究、侵袭实验、血管生成实验及类器官构建研究和小鼠成瘤实验等多种实验场景。


福利来了!现在不仅可以免费申领试用装,还有机会领取发文奖金~


镁伽生物基质胶试用装申领

Extragel 镁伽基质胶(标准型,不含酚红)1.5 mL 试用装


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镁伽生物基质胶发文奖金

活动时间:所有在线或发表时间在 2023-06-01 至 2024-06-01 期间的 SCI 文章,奖金申请截止时间 2024-12-01。


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申请方式:


Step 1. 扫码下载并填写【镁伽生物基质胶-发文奖励申请表】:


Step 2. 将文章的 PDF 文件或文献链接命名为「作者姓名 + 所在单位 + 发文期刊名称 + IF」;


Step 3. 以上文件/资料,一起发送至指定邮箱(wangxinxue@megarobo.tech)申请奖励,等待工作人员审核信息。


活动规则:


1. 发表文章中使用的基质胶为镁伽生物品牌基质胶,并在正文中注明「OM-xx 产品货号」等可显示镁伽生物基质胶产品的字样,即可参与本次活动(仅在补充材料中提及的不参与本次活动)。


2. 活动奖金根据发文影响因子高低进行发放,一篇文章发放一次奖励,多位共同一作者同时申请则平分奖励,如果一篇文章中引用多款镁伽生物基质胶产品,活动奖金不作累计;


3. 申请人需向镁伽工作人员提供所发表文章的电子版全文,并允许镁伽用于宣传及推广。


活动奖金:


根据文章的IF(影响因子)发放奖金:


● 1 ≤ IF<5:¥500 京东卡一张;

● 5 ≤ IF<8:¥800 京东卡一张;

● 8 ≤ IF<15∶¥1000 京东卡一张;

● IF ≥ 15∶¥1200 京东卡一张;

● Cell、Nature、Science、The Lancet 等顶级期刊:¥2000 京东卡一张;(仅针对一作及共同一作第一名,需单独申请审核)。


* 本活动最终解释权归镁伽科技所有,官方邮箱:officialmail@megarobo.tech,官方热线:400 0601 017。

 

 

 








镁伽生物基质胶优势特点:


● 自主研发与应用开发:基质胶(Extragel)由镁伽生物自主研发,并应用于类器官 3D 培养研究中;


● 严格质检:无乳糖脱氢酶升高病毒(LDEV)污染,且细菌、真菌和支原体检测均为阴性;


● 供应链保障:单批产量在 40L 级别以上,且批间性能稳定,保障可靠供应;


● 低内毒素:内毒素含量 ≤ 4 EU/mL,细胞毒性小。 



应用介绍:


室温条件下,镁伽生物基质胶(Extragel)能聚合形成具有生物学活性的三维基质,模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能,为体外培养提供营养环境和 3D 支架,有利于体外细胞的培养和分化。


同时,镁伽科学家们通过大量的实验验证保障产品的稳定性和实用性,多种应用实验数据均表明该产品的重复性良好且实验结果更佳,丰富的产品种类也为科研人员提供了更多选择。镁伽生物基质胶(Extragel)可广泛应用于 3D 培养实验,包括细胞生长和分化、代谢/毒理学研究、侵袭实验、血管生成实验及类器官构建研究和小鼠成瘤实验等多种应用场景。



案例分享:


细胞侵袭实验


除去 transwell 膜表面的细胞后,收集用乙酸洗脱下的与结晶紫结合的细胞,并检测洗脱液在 590 nm 处的吸光度。结果表明,基质胶(Extragel)能在细胞侵袭实验中充分发挥屏障作用。


HT-080 细胞的细胞侵袭实验结果图

成血管实验


通过 Calcium AM 活细胞染色,可观察到细胞在基质胶(Extragel)和国外 A 公司的基质胶产品中均具有良好的成管能力。


人脐静脉内皮细胞 HUVEC 在基质胶上的成管图

类器官生长实验


通过对比类器官平均大小的参数,结果表明镁伽的类器官专用基质胶比国外 A 公司的产品能更好的支持类器官生长。


hESC 来源的胆管类器官在 ExtragelOrg 类器官专用基质胶的生长情况

人胆管类器官实验


通过对人胆管类器官培养,并对其进行荧光染色和 3D 重建,结果表明基质胶(Extragel)能够支持胆管类器官的生长,并且保持其特异的生物标志物的表达。


人胆管类器官在基质胶(Extragel)中生长情况

*细胞成像由细胞核抗体 DAPI(蓝色),紧密连接蛋白抗体 anti-ZO-1(绿色)和细胞骨架蛋白抗体 F-actin (红色)染色而成。

肝癌类器官实验


通过对肝癌类器官培养,并对其进行荧光染色和 3D 重建。结果表明,肝癌类器官镁伽基质胶(Extragel)可以支持肝癌类器官的生长,并且保持其特异的生物标志物的表达。


肝癌类器官在基质胶(Extragel)中的生长情况 

*细胞成像由细胞核染料 DAPI(蓝色),肝脏细胞生物标志物 HNF4a(绿色)和肝癌标志物 GPC3(红色)的抗体染色而成。

肠癌类器官实验


通过对人结肠癌类器官培养,并在培养第 7 天对其进行荧光染色成像。结果表明,镁伽基质胶可以很好地保持肿瘤标志物的表达。


人结直肠癌组织来源的肠癌类器官

在 ExtragelOrg 类器官专用基质胶中的生长情况

* 细胞成像由肿瘤标志物 Ki67(绿色)、甲胎蛋白 AFP 的抗体(红色)、细胞骨架蛋白 F-actin 的染料(青色)和细胞核染料 DAPI(蓝色)染色而成。

癌旁组织


通过癌旁组织来源的肠类器官培养,并在培养第7天对其进行荧光染色成像。结果表明,镁伽基质胶可以很好地保持肠标志物的表达。


癌旁组织来源的肠类器官在基质胶中的生长情况

* 细胞成像由紧密连接蛋白 ZO-1(绿色)、上皮细胞标志物 CK19(红色)、细胞骨架蛋白 F-actin 的染料(青色)和细胞核染料 DAPI(蓝色)染色而成。

支持神经干细胞相关实验


大鼠神经干细胞在基质胶(Extragel)中培养 7 天后在显微镜下成像,并进行荧光染色分析。此实验常应用于神经毒性和神经元分化发育评估。


大鼠神经干细胞在基质胶中进行生长分化,并形成神经突网络

* 细胞成像由神经细胞标志物 Tuj1 的抗体(红色)和细胞核染料 DAPI(蓝色)染色而成。右图为加了伪彩的神经元照片。

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内容策划:王丹琦
内容审核:朱卿

图片来源:图虫创意、镁伽

题图来源:图虫创意


参考文献

[1]. Zhao, Z., Chen, X., Dowbaj, A.M. et al. Organoids. Nat Rev Methods Primers 2, 94 (2022).

[2]. Kleinman HK, et al, Basement membrane complexes with biological activity. Biochemis-try 25: 312 (1986).

[3]. Vukicevic, Slobodan, et al. ldentification of multiple active growth factors in basementmembrane Matrigel suggests caution in interpretation of cellular activity related to extra-cellular matrix components. Experimental cell research 202: 1 (1992).


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编辑: 王凯

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