
Q-PCR 和 RT-PCR 都是分子生物学中常用的技术,用于检测和定量特定的核酸序列。
- 为什么有时候选择 Q-PCR 有时候选择 RT-PCR ?
- 两个实验有哪些原理和应用上的不同?
在本文,我们汇总了两类 PCR 原理、操作方法、选择方式,一定可以解决你的困扰。开始之前还是先马住 PCR 专题吧 👇 操作视频、实验经验、实验问答、文章每周更新!
RT-PCR 原理与应用
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原理:RT-PCR 结合了逆转录(Reverse Transcription)和聚合酶链式反应(PCR)的过程。
应用:RT-PCR 主要用于检测和定量 RNA 分子,通常用于研究基因表达、病毒载量等。
Q-PCR 原理与应用
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原理:Q-PCR 也是基于 PCR 的技术,但它引入了荧光探针或荧光染料来实时监测 PCR 反应的进程。荧光信号的强度与目标序列的数量成正比,因此可以定量地测量起始样品中的目标核酸数量。
应用:Q-PCR 主要用于定量目标 DNA 或 cDNA 的数量。它可以用于病毒载量、基因表达水平、拷贝数变异等研究。
实验选择方式
如果你关心的是目标 RNA 的表达水平,比如研究基因表达,检测特定的非编码 RNA 等,你应该选择 RT-PCR。
如果你需要定量 DNA 或 cDNA 的数量,比如测量病毒载量、检测基因拷贝数变异等,你应该选择 Q-PCR。
最后,和大家聊一下定义的区别:很多同学分不清 RT-PCR 和 Q PCR,是因为缩写问题。
Real-time PCR( 实时荧光定量PCR)和 Reverse transcription PCR(反转录PCR)看起来都可以缩写为RT-PCR,但是,国际上的约定俗成的是:RT-PCR特指反转录 PCR,而 Real-time PCR一般缩写为 qPCR(quantitative real-time PCR)
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