多年 CCK-8 经验总结请收好,这些坑不要再跳了

2023-08-11 17:06 来源:微信公众号 - ShengWuXueBa 作者:丁香实验
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在细胞培养实验过程中,很多科研汪都明白试剂盒带来的巨大便利,MTT 花 4 小时才能得到的结果用 CCK-8 只需 1 小时。
不仅如此,CCK-8 对细胞的毒性极小,完全可以测完细胞增殖或药物毒性后再继续用细胞进行下游实验。下面就来为大家介绍一下 CCK-8 的具体情况。
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细胞毒性检测实验对比


CCK-8注意事项合集

1. 第一次做实验时,建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入 CCK-8 试剂后的培养时间。
2. 接种时注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来,导致每孔中的细胞数量不一致。
3. 培养板周围一圈孔培养液容易挥发,为减少误差,建议培养板周围的四边每孔只加培养基。
4. 建议采用多通道移液器,减少平行孔间的误差,加 CCK-8 时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基液面下加,容易产生气泡,干扰 OD 值。
5. CCK-8 反复冻融会增加背景值,干扰实验测定。
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CCK-8 常见问题解答


Q:CCK 的保存和稳定性如何?
A:CCK 稳定性高,避光条件 -20℃ 有效期 2 年,4℃ 有效期 1 年。经常使用建议 4℃ 保存,避免反复冻融。CCK 正常颜色为粉红色,若颜色发生明显偏差,质量可能有发生变化。
Q:在实验中 OD 值太高,怎么解决?
答:可以缩短加入 CCK-8 后的培养时间。例如:可以把加入 CCK-8 试剂后的培养时间由 2 小时缩短为 1 小时。此外,可适当减少细胞的数量。
Q:如果 OD 值太低,怎么解决?
答:可以采取 2 个办法:1、适当增加细胞数量;2、延长加入 CCK-8 试剂后的反应时间。
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编辑: 王凯

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