WB 又跑歪了!4 个跑歪案例一次说清

2023-08-10 17:31 来源:微信公众号 - ShengWuXueBa 作者:丁香实验
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相信很多人在做 Western blot 实验时,会遇到各式各样的条带。很多条带在跑胶的过程中就已经歪了。本文汇总 WB 跑歪案例,带你解决条带问题。


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「进阶」

凹凸条带原因与方法



1、凹凸条带真的非常常见
可能原因:可能是由于胶未配好(凝胶未能完全聚合,胶中有颗粒或气泡,凝胶未冷却好,),也可能是电压过高。
解决方法:正确添加质量合格且未过期的 AP 及 TEMED;过滤配胶的试剂保证配胶过程中胶内无气泡;凝胶冷却好后再上样;降低电压。
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2、条带出现黑点或黑斑?
可能原因:试剂污染,抗体结合到封闭剂。
解决方法:使用新鲜配置的试剂;过滤封闭液;选用其他类型封闭液。
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3、条带中出现边缘规则的白圈
可能原因:转膜时膜和胶中间有气泡,或抗体在膜上未均匀分散。
解决方法:制备转膜凝胶时用玻棒赶去气泡;使用摇床孵育抗体。
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以上就是 WB 跑胶条带异常结果解读。
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编辑: 王凯

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