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转染是一种常用的实验技术，可用于基因过表达、基因沉默、蛋白质功能研究和药物筛选等应用。本文将介绍 4 种常用的转染方法：慢病毒转染过表达细胞系👉 点此查看 protocol
慢病毒感染法可感染几乎所有类型的细胞，易于整合到宿主细胞的基因组中，并且表达稳定。因此，它被广泛应用于构建稳定转染细胞株，特别是在医学研究领域。PEI 转染法👉 点此查看 protocol
PEI（聚乙烯亚胺）转染法是一种简单而有效的转染方法，适用于多种细胞类型。PEI 作为阳离子聚合物，能与负电荷的 DNA 形成复合物，促进其进入细胞。电穿孔转染法👉点此查看 protocol
电穿孔转染法通过物理或化学手段将外源 DNA 导入细胞，用于研究基因表达调控和基因治疗。电穿孔法转染效率较高，但需要昂贵的仪器设备。磷酸钙转染法👉 点此查看 protocol
磷酸钙转染法是一种简单且成本较低的转染方法，适用于体外和体内细胞。它通过磷酸钙与 DNA 形成沉淀，然后被细胞摄取。这种方法已被许多实验室广泛采用。
「进阶」
转染注意事项与经验汇总
其中慢病毒转染过表达细胞系更为常用，在实验中，还需要注意以下事项：
实验前 30 min 对细胞间及超净台进行充分紫外照射；
进入细胞间更换无菌衣，无菌拖鞋等；
保证细胞接种密度 30~40%，便于后续转染操作；
确定嘌呤霉素最低致死浓度时，将细胞以 40~50% 的密度接种于 6 孔板，置于细胞培养箱过夜培养。次日待细胞贴壁后，PBS 润洗，分别更换含嘌呤霉素的新鲜培养基（终浓度为 0、0.5、1、2、4、8 µg/mL）。细胞培养箱孵育 48 h 后观察细胞状态及死亡情况，确定嘌呤霉素的最低致死浓度，用于后续稳转细胞系筛选。
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