又到了一周一次的组会,师妹在组会上哭诉求助:培养的细胞一直难成球、可重复性也很差,明明按 protocol 做的,经历繁琐的离心、换液,结果还是不理想…
师姐连忙支招:可以看看我刚发在群内的《3 个细胞培养难点与解决方案》,应该可以解决你的问题。另外培养「硬件」孔板也很重要!今天给你推荐一个「高端」孔板—— BIOFLOAT™ 96 孔板,3D 细胞、原代细胞、细胞系都能养,现在扫码还能参与免费试用活动!

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只需要 2 到 24 小时即可完美成球
操作简单,避免反复离心和换液
3 个培养难点与解决方案
难点 1:细胞因子低活性导致多细胞球体诱导生长失败
解决办法:加入具有安全性、有效性和一致性的高质量重组细胞因子。
难点 2:细胞换液导致细胞丢失及成像扭曲
解决办法:使用 U 型板底减小细胞与板底的接触;还可以选择换液比较方便且涂层更坚固的 96 孔板培养 3D 细胞。
难点 3:频繁换液和洗涤导致水凝胶表面损坏,细胞贴壁生长
解决办法:选择耐刮擦表面的培养耗材。
细胞成球难依旧是很多科研人的一大困扰,为此莎斯特研制了一款专门针对 3D 细胞培养的 BIOFLOAT™ 96 孔板,目前已经实现了许多具有挑战性的细胞球培养,比如原代干细胞的球体,只需要 2 到 24 小时即可完美成球!操作简单,避免了让人心力交瘁的反复离心和换液,初学者妥妥上手。一起看看 BIOFLOAT™ 96 孔板具体有哪些优势?
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快速成球
BIOFLOAT™ 表面能够确保快速成球。细胞系、细胞类型不同,成球时间也不同,一般需要 2~24 小时。实验测试表明,相比其他类似产品,相同细胞在相同培养条件下,在该表面上更易成球(图 1)。

图 1:BIOFLOAT™ 细胞培养板促使细胞快速成球。每孔接种 200 微升细胞密度为 30,000 个细胞/毫升的 3T3 细胞悬浮液。
重复性高
借助 BIOFLOAT™ 表面形成的球体具有极高的圆形度,由此可实现数据的高度一致性。不会形成沉积物、卫星团聚体或不规则聚合体,从而确保了极高的可重复性(图 2)。

图 2:BIOFLOAT™ 表面形成的球体具有极高的圆形度。每孔接种 200 微升细胞密度为 30,000 个细胞/毫升的 3T3 细胞悬浮液。数值越高,代表球体越圆。数值 1 代表正圆形。
BIOFLOAT™ 表面具有高度抗粘附特性。体外培养的贴壁细胞,无法粘附于培养容器表面,细胞与细胞之间更容易形成接触(图 3)。

图 3:BIOFLOAT™ 细胞培养板与无涂层细胞板培养细胞效果对比。将 3T3 细胞以不同的细胞密度接种在 BIOFLOAT™ 细胞培养板上,无涂层培养板组作为对照。三天后通过显微镜记录结果,可以明显看到 BIOFLOAT™ 上已成功形成球体且球体大小可能受到每个孔细胞数量的影响。相反,在无涂层表面上,3T3 细胞可以贴壁生长,但不能形成球体。
BIOFLOAT™ 涂层坚固,非常便于日常实验使用,表面特性不会因为多次洗涤或移液器吸头碰触而受损(图 4)。

图 4:使用标准移液器吸头轻微刮擦孔底(中等压力刮擦一遍),再用大力刮(约 30 秒)。每孔接种 200 微升细胞密度为 30,000 个细胞/毫升的 3T3 细胞悬浮液。
适合难成球的细胞类型培养
得益于 BIOFLOAT™ 细胞培养板表面的可靠质量,即使是难度高的细胞也可培养出完美球体,比如原代肝脏细胞培养(图 5)。

图 5:BIOFLOAT™ 细胞培养板培养原代肝细胞,第八天就培养出相对完美的球状原代肝细胞。
BIOFLOAT™ 培养板具有帮助细胞快速成球、重复性高、适合难成球细胞类型培养的特点。对细胞培养的新手也很友好,无需离心,换液方便,不惧刮擦!
内容策划:潘成
内容审核:朱卿
题图来源:图虫创意

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