很多同学做流式细胞实验，还有一些问题：
如何进行实验设计？细胞悬液样本怎么制备？流式细胞仪器怎么使用？如何分析流式检测的结果图？
今天就给大家总结了一波从「实验设计」到「结果分析」的全流程 protocol，以下内容来自丁香实验「流式细胞术」，超全 protocol 不断更新，建议点击收藏！
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第一步设计你的流式细胞实验很多同学在实验设计的时候就埋下了隐患，最常见的问题就是——对照设置不合理，最后导致整体实验失败或数据不理想。
流式对照至少有 5 种。
生物学对照，空白对照，同型对照（Isotype control），补偿对照（也叫单阳性对照）和 FMO 对照，主要目的是为了避免出现的假阳性或假阴性结果。
看不懂以上对照的含义也没关系，我们以一个具体的凋亡实验来看看如何设置对照组：👉 点此查看对照组设置具体案例！
第二步细胞悬液样本制备
流式细胞术的分析检测建立在单个细胞的基础上，所以制备合格的单个分散的细胞悬液是非常关键的一环。
对不同来源和不同形式的样品，根据各种样品的特点可选择不同的分散方法。
单层培养细胞、血液、各种脱落细胞等样品
标本经过简单的制备悬液，离心分离处理，就可以得到分散较好的单个细胞悬液，是理想的流式细胞术检测对象。
不同组织来源的实体组织标本
采用酶消化法、机械法和化学试剂处理法来分散细胞。
石蜡包埋组织单细胞悬液
可使大量存档的临床资料重新得到研究与利用，从而扩大了流式细胞术的应用范围。样品制备一般通过切片、脱脂、水化、消化及终止消化后过滤再收集细胞悬液，去除碎片的单细胞悬液用 70％ 乙醇固定保存。👉点此查看流式细胞样本制备 protocol
第三步流式检测操作流程很多同学第一次操作流式细胞仪器的时候非常紧张，生怕哪一步做错，弄坏了上百万的实验设备。仪器的操作确实有很多讲究，比如：
「检查供液槽和废液槽：供液槽应含足够的仪器缓冲液，废液槽应在上次使用后清洗干净。」
流式细胞仪器使用方法和流程已帮大家做好梳理：👉点此查看流式细胞仪使用操作
第四步流式检测结果分析
实验结果图通常有一维直方图、二维点图、等高线图、密度图等几种。
由数据还可以做出标准曲线进行定量分析。不过很多新同学很难读懂图片代表的含义。
想要了解「Gate」和 「Regin」？流式图中的阴/阳（N/P）如何划分?坐标轴的意义？二维图怎么看？等等问题。
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如果你是实验小白可以收藏、转发文章，在做实验的时候按照以上流程一步步操作。如果你是师兄师姐，也可以把本篇文章分享给师弟师妹们！
最后看看「流式细胞术」专题内还有哪些内容？
👉流式细胞术的应用及技巧👉组织（肺、脾脏）流式细胞术前处理👉26 个流式细胞术常见问题问答，经典！👉荧光标记法（流式细胞仪标本制备）👉流式细胞表面染色
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