
常见 PCR 实验有 RT-PCR、QPCR,但其实随着技术不断进步,更多 PCR 技术可以解决各种实验需求。今天介绍 3 个 「PCR 技术」,包括 dPCR、MPCR、巢式 PCR。还附上了资料包,点击收藏,立即 get PCR 教学视频以及 protocol。🎁 点此领取更多 PCR 教学资料包在了解背景后,我们一起来看看这 3 个进阶 PCR 都是什么吧!
dPCR
数字PCR(digital PCR, dPCR)技术是继real time PCR技术的第三代PCR技术,该技术具有超高灵敏检测特点。相较于 qPCR,数字 PCR 可让你能够直接数出 DNA 分子的个数,是对起始样品的绝对定量。
数字 PCR 技术应用领域广泛,包括肿瘤早期筛查、遗传生殖、感染性性疾病检测、环境微生物检测、产前诊断、科学研究和生物制药等领域。
MPCR多重 PCR(Multiplex polymerase chain reaction,MPCR)是在普通 PCR 的基础上,在同一个反应体系中加入不同的引物对,针对不同的模板或同一模板的不同区域进行特异性的扩增,从而得到多个目的片段,结合一定的检测手段进而实现同时对多个靶标进行诊断的技术。具有高效性、系统性、经济简便性,多种病原体在同一反应管内同时检出,将大大的节省时间,节省试剂,节约经费开支。多重PCR应用于:基因诊断、肿瘤诊断、病原微生物的检测,植物分子育种、基因表达检测、病虫害检测,病原菌污染检测等。
nested PCR
常规 PCR 在对模板进行扩增的过程中,引物与模板之间会出现非特异性配对,导致产生非特异性产物。为了提高 PCR 扩增的特异性,人们对常规PCR 进行技术改良,发明了巢式 PCR(nested PCR)。巢式 PCR 大多应用在当模板 DNA 含量较低时,用一次 PCR 难以得到满意的结果,这时用巢式 PCR 的两轮扩增可以得到很好的效果。巢式 PCR 操作简单,所需条件与常规PCR相同,但与常规 PCR 相比进一步提高了反应的特异性与灵敏性,在微生物学、生物信息学、生物医学等方面有着极其广泛的应用。
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