丁香实验邀请有 3 年以上蛋白质经验的硕博实验高手，替大家答疑解惑。从「蛋白质提取」的实验步骤到保存，带你手把手完善蛋白质提取实验。
（本专题合作专家）
各组织提蛋白
经验总结
接下来推荐 3 个丁香实验合作专家投稿的实验 protocol，经过多年验证，可操作性强。
蛋白质保存
经验总结
在辛辛苦苦提取到蛋白后，不免会面临另一个问题：如何储存蛋白呢？
首先，储存方法的选择取决于蛋白质的稳定性，以及后续实验使用蛋白质的时间和用途。储存时需要避免接近蛋白质稳定极限的储存条件（例如极端 pH 或者接近蛋白质等电点的 pH）。
保存方法：
1. 短期保存（24 小时内）：大多数的蛋白质可以保存在 4°C。
2. 在 4°C 超过 24 小时需要考虑对蛋白样品灭菌过滤（使用 0.22 µm 过滤器），或者加入抑菌剂（例如 0.1% 叠氮化钠）以避免细菌生长。值得注意的是，并非所有蛋白质都能在 4°C 长时间保持稳定。
3. 长期保存（一周以上）需要将蛋白样品冻存。使用液氮或者干冰/乙醇混合物将其快速冷冻避免蛋白质变性。可以将样品分装至多个管子中，来避免反复冻融可能造成的活性降低或影响结构。
4. 保存几个月：可以将其保存在-20°C，并加入 50% 甘油避免冻住。
5. 保存几个月至几年：此时应把样品在-80°C 或液氮中冷冻。在这种温度下，加甘油就没那么有必要了，但加 5～50% 的甘油可以帮助保持蛋白质的稳定性。
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