细胞分选（cell separation）技术是根据细胞的某种特性，从混合细胞样本中挑选出特定细胞类型，之后进行细胞的分析或是后续实验，比如从组织或血液中直接提取出 B 细胞和 T 细胞，之后开展基础生物学、生成抗体和开展单细胞测序等研究。
但是在进行目标细胞分选时，你是否遇到过以下问题：
☞ 组织难解离，消化后仍有细胞团或者有杂质
☞ 流式细胞仪设备昂贵、技术复杂、操作费时
☞ 细胞死亡率高或功能受损，影响下游实验
☞ 磁珠分选时细胞堵塞分选柱
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接下来我将针对同学们日常遇到的问题进行逐一解答。
组织难解离，消化后仍有细胞团或者有杂质
可用胶原酶、DNA 酶、胰酶联合消化，可使细胞团块解聚，或者充分振荡，混悬细胞，打散细胞团块，也可采用细胞筛网来过滤团块。去除杂质操作可以：去死细胞，密度梯度离心或离心清洗去碎片。
流式细胞仪设备昂贵、技术复杂、操作费时
目标细胞的分选除了使用流式分选技术，还可采用免疫磁珠分选或亲和板结合分离等方法，免疫磁珠操作便利用时短，可获得高纯度（90～99%）、高回收率的分选细胞群，且对细胞无损伤；亲和板结合分离法可让抗原阳性的细胞都与相应抗体结合，抗原阴性的细胞可从未吸附的细胞悬液中获取，欲去除细胞悬液内某一细胞亚群时，本法更适用。
细胞死亡率高或功能受损，影响下游实验
如果已正常去除死细胞群，可能是传统的细胞分选仪在高压下运行导致的细胞损伤，让细胞在分选后功能丧失、活力下降，此时可以更换为别的分选方式，如 MACS，但需要注意 MACS 每次分选针对一个标记物。如果未去除死细胞群，可以使用死活染料或是去除死细胞磁珠对样品进行死细胞去除处理。
磁珠分选时细胞堵塞分选柱
细胞内杂质未去除干净，可通过细胞筛网进行过滤。制备细胞样本时，需要对细胞进行计数，不要超过分选柱容量，细胞量太大容易堵。细胞悬液制备的时候尽量不产生气泡，加样需缓慢，也可对缓冲液进行脱气处理。
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内容策划：王丹琦
内容审核：周育红
题图来源：美天旎