盘点! 3 种核酸提取方法(附优缺点)

2023-04-20 19:05 来源:微信公众号 - ShengWuXueBa 作者:生物学霸
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DNA 提取很基础,但是不掌握方法,还是不能拿到想要的结果。比如:最终没得到 DNA、DNA 得率太低、PCR 没条带或者拖尾......
别担心,丁香实验上线「DNA提取」标准 protocol ,邀请有 3 年以上细胞培养经验的硕博实验高手,帮大家优化 protocol!
(本文合作专家)

DNA 提取

标准流程


丁香实验总结了用不同方法提取 DNA 的原理,步骤,还有各个方法的优缺点。




DNA 提取

常见问题


在学会标准流程后,可能还会有细节问题困扰大家,比如:

Q:磁珠越多,提取效果越好吗?


答:磁珠的主要特点是既可以分散于液体中,也可以在外加磁场作用下以固态方式和液相分离,任何试剂体系,磁珠和液体的比例都应该是有一定阈值的,超过一定的比例,过多的磁珠将因为无法均匀分散于液体中,而丧失其分散的特性,也使得洗涤过程中无法充分增加核酸磁珠和液体接触的效率。而过量的磁珠也会吸附更多的杂质,对于除杂的效果影响非常大。
Q:洗涤次数越多,提取效果越好吗?
答:增加洗涤次数确实有利于提纯核酸,但考虑到每次洗涤都会损失一定量的核酸,且增加了核酸断裂水解的可能性,所以一般来说洗涤次数控制在 2~4 次为宜。
Q:最终没得到 DNA 怎么办?
答:可能是缓冲液 3 和漂洗液中没有加入无水乙醇;
Q:DNA 得率低怎么办?
答:可能是样本不新鲜或者样本经过反复冻融。
以上就是丁香实验最新上线的  DNA 提取实验,查看更多常见问题,可订阅 DNA 专题。

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编辑: 王凯

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