7 年感受态细胞制备经验!

2023-04-15 17:31 来源:微信公众号 - ShengWuXueBa 作者:生物学霸
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随着感受态细胞越来越广泛应用,它的分类、制备都显得尤为重要。我们可以根据不同实验目的,将感受态细胞分为以下几类:
  • 原核受体细胞(大肠杆菌G-、枯草杆菌G+、乳酸菌G+ 等 )
  • 真核受体细胞(酵母菌、昆虫、动植物等)

究竟感受态细胞如何制备?各种感受态细胞的区别、用途和特征?常用的大肠杆菌感受态如何制备?丁香实验整理了感受态细胞分类、protocol、应用等图文经验。简单几分钟,轻松搞定!





「进阶!大肠杆菌感受态」

制备与问题排查


大肠杆菌感受态制备时很容易受到影响。究竟正确的 protocol 以及影响因素都有哪些呢?


第一步:我们最好从 -70℃ 或 -20℃ 甘油保存的菌种中直接转接用于制备感受态细胞的菌液。不要用已经过多次转接,及贮存在 4℃ 的培养菌液。
第二步:用于转化的质粒 DNA 应主要是超螺旋态的,转化率与外源 DNA 的浓度在一定范围内成正比,但当加入的外源 DNA 的量过多或体积过大时,则会使转化率下降。
更多制备方法及问题均来自下方文章,点击下方卡片即可查看全部。



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编辑: 王凯

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