小 A: 又要开始做细胞转染了,之前每次转染完细胞状态都惨不忍睹,效率又低的离谱……实验进度硬生生卡在这,真的急!那些细胞状态又好、效率又高的丝滑转染到底是怎么做的啊?
上面小 A 同学提到的细胞转染即是将外源分子如 DNA,RNA 等导入真核细胞的技术,是分子生物和细胞生物学最常见的实验技术。
在众多实验中,细胞转染绝对是最难搞定的「拦路虎」之一,相信有太多实验人都有上面小 A 的困扰和咆哮了。今天在这里给大家总结了 5 个做转染实验的小 tips,学到就是赚到,分分钟带你搞定转染!(文末免费试用转染试剂,千万别错过~)
1
细胞的状态:不要急于求成,让细胞处于最佳的生长状态再做,也不要用传了很多代的细胞去做,否则细胞的形态早已发生变化。
2
细胞的融合度:细胞的融合度达到 70%~80% 比较合适。
3
加入无血清培养基后 5~6 小时更换全培养基:时间过长,对细胞是有毒性。
4
转染的质粒一定纯度好、浓度高、无内毒素:浓度不要低于 0.35 ug/ul。
5
48 小时 mRNA 表达最高,72 h 蛋白表达最高。
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关于细胞转染,现在有多种转染方法可以实现,下面为大家整理了常见的转染方法及它们的原理、应用、特点,一键收藏,方便查阅▼▼▼
在上面的这些方法中,利用脂质体转染试剂及病毒感染是无疑最为常见的将外源基因导入细胞的方法。但转染试剂用量大,进口试剂买下来那么贵又那么点,每次用起来真的是肉疼……别再在一条路上埋头干到底了,不妨把眼光转向国产试剂~
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国产与进口试剂的 pk 一直源源不断,虽然在传统视角里大多进口试剂以质量优,口碑好占据上风,但是在经历了数十年的飞速发展,国产试剂公司本着提高科研服务质量的出发点,扎根潜心研发,如今质量也是十分过硬,甚至代表国货走出国门,走向国际舞台。
汉恒生物自主研发的转染试剂 LipoFiter 推出已有 6 年,产品转染效率高,悬浮/贴壁细胞均可适用,受到了众多科研工作者的认可。汉恒实验室建立了 IOS9001 质量体系,拥有中科院博士研发团队,客户引用产品发表于 Molecular Cancer、NAT COMMUN、 Science advances 等知名期刊。
现在限量推出 LipoFiter 的试用装,机会难得,赶紧抓住这次薅羊毛的机会,轻松助力细胞转染~
内容策划:王丹琦
内容审核:朱晓芳
题图来源:图虫创意
客户发表文献部分
·Tumor-derived exosomes induce N2 polarization of neutrophils to promote gastric cancer cell migration
(杂志:Molecular Cancer,IF=27.401,江苏大学医学院)
·Low expression of TRAF3IP2-AS1 promotes progression of NONO-TFE3 translocation renal cell carcinoma by stimulating N6-methyladenosine of PARP1 mRNA and downregulating PTEN
(杂志:Journal of Hematology and Oncology,IF=17.384,南京大学)
·Switch receptor T3/28 improves long-term persistence and antitumor efficacy of CAR-T cells
(杂志:Journal for ImmunoTherapy of Cancer,IF=13.751,山东大学)
·Positive natural selection of N6-methyladenosine on the RNAs of processed pseudogenes
(杂志:Genome Biology,IF=13.583,中山大学)
·TRIM24 facilitates antiviral immunity through mediating K63-linked TRAF3 ubiquitination
(杂志:Journal of Experimental Medicine,IF=11.743,中国科学院上海营养健康研究所)
·Targeting miR-21 with NL101 blocks c-Myc/Mxd1 loop and inhibits the growth of B cell lymphoma
(杂志:Theranostics,IF=11.556,浙江大学医学院第二附属医院)
·Tubular epithelial cell-to-macrophage communicationforms a negative feedback loop via extracellular vesicletransfer to promote renal inflammation and apoptosis indiabetic nephropathy
(杂志:Theranostics,IF=11.556,安徽医科大学)
·N6-methyladenosine-induced circ1662 promotes metastasis of colorectal cancer by accelerating YAP1 nuclear localization
(杂志:Theranostics,IF=11.556,郑州大学第一附属医院)
·Tubular-specific CDK12 knockout causes a defect in urine concentration due to premature cleavage of the slc12a1 gene
(杂志:Molecular Therapy,IF=11.454,东南大学医学院中大医院)
·A novel epigenetic AML1‐ETO/THAP10/miR‐383 mini‐circuitry contributes to t(8;21) leukaemogenesis
(杂志:EMBO Molecular Medicine,IF=10.624,中国人民解放军总医院)

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