暴风哭泣!RNA 和蛋白水平同时敲低,这么难吗(附方法论)

2023-04-07 18:05 来源:微信公众号 - ShengWuXueBa 作者:生物学霸
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最近,研二的小师妹差点被 knock down 给急疯了。想做基因敲低实验,目标基因找了快一个月,做起来时发现转染效率非常低。RNA 终于敲低,蛋白又死活没变化!3 个月过去还是不出结果,实在绷不住了,在组会上哽咽地寻求导师帮助。导师只能苦笑,心里默默后悔:当初怎么就招了她呢!


其实基因调控研究每一步都有方法论,比如:

找目标基因?可以通过查阅文献、数据库查阅、基因芯片、细胞系检测 4 个方法实现。


基因调控设计?可以通过构建质粒/慢病毒/腺病毒过表达目标基因;通过构建质粒/慢病毒、crispr/cas9 干扰目标基因


更多方法论诸如:怎么根据样本选择最佳转染工具?细胞、动物水平该如何做好调控实验?


调控后如何做好功能验证?如何借助基因调控发高分 SCI......都将在丁香园联合汉恒生物举办的主题为「从操作到案例,教你搞定基因上调下调」线上讲座中重点讲解。4 月 12 日下午 15:30 ,1 小时带你从细胞到动物,拿捏思路与操作,玩转基因上调下调,一对一解决你的敲减、过表达等细节问题。实用干货,不容错过,观看直播更有机会领取精美笔记本!


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1、搞清基因调控思路


本次直播将从基础入手,带你理清基因调控课题的思路,从目标基因找寻到细胞水平调控,再到动物实验验证,最后回归临床,0 基础也能 get 基因调控的「玩法」。


(以肿瘤研究为例,调控目标基因)


2、选对基因调控工具


目的基因功能机制研究时,常见的方式是敲减过表达突变,可构建相应载体或基因编辑技术来实现。比如病毒载体:慢病毒、腺病毒和腺相关病毒三种。在本次直播中你将学会各类基因调控工具的选择方式找到最适配自己的那一个


3、搞懂细胞动物水平基因调控


了解背景后,就开始实际操作了。动物注射操作系列、细胞转染 & 病毒感染如何操作做标准?过表达、敲减效率低怎么办?本次直播带你掌握细胞动物基因调控的最佳方式


4、模仿基因调控高分案例


直播中,更有已发表的高分 SCI 作为案例,让你理解基因调控的重要性。带你复制高分课题科研思路基因调控「套路 」


无论是过表达、敲减还是突变;不管是细胞系、原代细胞还是动物模型,针对具体需求,我们教你做出最优解!


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内容策划:王丹琦

内容审核:朱晓芳

题图来源:图虫创意


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编辑: 王凯

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