混迹实验圈，可以熟练操作 WB 的你，是不是一说内参就想到 beta-actin，甚至有的同学会把 beta-actin 当做全部内参的代名词！
但其实，并不是所有情况都能用 beta-actin 做内参，还有 9 类常用内参蛋白：
这些蛋白都是什么？
「3 步选择」
哪个内参更适合？
师姐，在了解这些内参后，应该怎么挑选最适合自己的呢？
有 3 个衡量指标，需要大家参考：
第一，看分子量大小
内参蛋白与目的蛋白分子量需要有一定差异。例如， 如果需要检测自噬 marker LC3B（~14-17 kDa），则应避免使用 Cofilin 或 Cyclophilin B（~20 kDa）这些分子量与目标蛋白接近的内参蛋白。
第二，了解表达水平
选择的内参蛋白需要在待测样本中是高表达的。常用的内参蛋白是由管家基因高表达的，是细胞发育和维持细胞活力所必须的。例如，细胞核的内参蛋白 PCNA，在 DNA S 期表达，因此对于非增殖细胞不推荐使用。
第三，确定表达因素
选择表达不受实验变量影响的内参，例如，细胞应激反应中 HSP60 会表达上调，因此在研究细胞应激实验中，应该避免使用 HSP60 作为内参蛋白。
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策划｜Olaf
配图｜丁香实验设计团队