
555!WB 仿佛玄学,跑了一周也没出好条带,做梦都是条带糊了......
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以下列举的全是真实经验,满满干货。
Q:出现黑点或黑斑?
A:试剂污染,抗体结合到封闭剂。解决方法是使用新鲜配置的试剂;过滤封闭液;选用其他类型封闭液。
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Q:条带中出现边缘规则的白圈?
A:转膜时膜和胶中间有气泡,或抗体在膜上未均匀分散。制备转膜凝胶时用玻棒赶去气泡;使用摇床孵育抗体可以解决。
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Q:条带拖尾咋回事?
A:样品有未溶颗粒;分离胶浓度偏大。解决方法是充分溶解,加样前离心;换小浓度分离胶
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