眼看就要开题了，师妹一筹莫展：
师妹
师兄，老师让我研究这个基因如何影响疾病进展，我不知从何下手啊？
这也是有常规套路的，基因的过表达或敲低（除）都可以做。
师兄
师妹
是不是在细胞水平、动物模型上都要这样验证呢？
确实是这样，但是体内外研究所用的表达载体和方法还是有很大讲究的，认真看看下面的攻略吧！
师兄
「已知一个基因，求表型/功能影响」这是进行基因调控研究的常规思路。「载体构建与表达」则是开展研究的必备手段，面对眼花缭乱的载体 list，选择困难症又犯了。问题不大，对症下药很重要～敲黑板！师兄提到的「载体构建与表达最全攻略」终于提上日程，线上讲座教你如何对症下药～
无论是过表达、敲低还是敲除；
不管是细胞系、原代细胞还是动物模型；
不用纠结表达载体启动子、荧光标记的选择；
不必担心化学转染、电转还是病毒转染……
针对具体需求，我们教你做出最优解！
丁香学术联合汉恒生物，邀请领域内资深技术专家，开展「载体构建与转染」线上讲座，赶快预约报名吧！从载体构建、转染试剂方法到动物模型载体的选择/应用，为大家的基因功能研究提供最全攻略。实用干货，不容错过，观看直播更有机会领取「科研顺利」冰箱贴。
本次线上直播，由具有 8 年行业经验、长期从事表观遗传学方面研究的杨燕老师主讲，干货满满。
不同载体的如何构建？
两个明确：一是明确实验体系；二是明确研究目的。
图 1 基因功能研究的两种类型
实验体系
无非就是在体外（in vitro）和体内（in vivo）两种
研究目的
主要有三种手段 ① 过表达、② 敲低（减）表达、③ 敲除，剩余的就是检测这三种干预手段对功能表型的定量和定性影响。
载体选择要点：
不同载体也对应着不同的选择要点，比如：
● 过表达载体：重点关注启动子、标签和选择标记。其中选择标记主要目的是区分表达与非表达目的基因的细胞。
● 敲低（减、降）表达载体：启动子选择 U6；标记选择通常跟过表达类似，尽量选择绿色荧光和 PURO。
● 敲除载体：目前最常用的就是 CRISPR-Cas9 的基因敲除载体，该系统是个二元结构，需要在同一个细胞中一起表达 Cas9 和针对目的基因的 sgRNA，优先推荐二合一型载体。
看到这里是不是对载体构建与转染有了一个初步的了解呢？在这场直播中我们还将教你：不同载体转染方法及病毒包装和感染的选择？常见细胞动物模型的载体选择？基于常见动物模型，具体的应用案例有哪些？
听了上面的介绍，是不是有些心动呢，赶快报名参加吧！
内容策划：那雪妍
内容审核：朱晓芳
题图来源：图虫创意
点击【阅读原文】即可报名直播～
