XX 生物研究所交流 1 群
隔壁同期老赵
水逆了，最近细胞大片污染，操作明明都没问题。
白月光女神
独立的细胞房真的很重要，老是几个组共用，人多，也容易交叉污染。
高冷李哥哥
细胞房应有明确的标准操作流程，人员进出登记，换衣服的区域也应定期紫外灭菌。不过我最近也头疼，有人懂球体细胞培养吗？我的多细胞球体又挂了，养了好久！
顶刊收割机老白
球体培养好啊，容易发高分文章。现在药物高通量筛选、肿瘤模型建立、内皮血管生成、类器官培养、组织再生和 3D 打印等诸多研究领域，都有 3D 细胞培养技术的身影。
高冷李哥哥
话是这么说，但细胞成球真的难。明明按 protocol 做的，还要经历繁琐的离心、换液，结果还是不理想。
顶刊收割机老白
细胞成球有简单的手段，重复性也会好很多。有种适合多细胞球体培养的 96 孔板很适合你，我上篇 CNS 就是用的这种培养办法。
你是否也在为多细胞球体培养而烦恼呢？莎斯特研发出了一款帮助细胞快速成球的 96 孔板，已经实现了许多具有挑战性的细胞球培养，比如原代干细胞的球体，只需要 2 到 24 小时即可完美成球！操作简单，避免了让人心力交瘁的反复离心和换液，初学者妥妥上手。快识别下方二维码申请试用吧！
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了解球状 3D 细胞培养
多细胞球体是常见的 3D 细胞培养体系之一，能够由单一细胞类型产生，也能够通过共培养方式由不同种类的细胞产生。随着生物医药技术的发展，多细胞球体因具有更旺盛的细胞分泌状态及接近体内的细胞微环境，其广泛地应用于药物高通量筛选、肿瘤模型建立、内皮血管生成、类器官培养、组织再生和 3D 打印等诸多研究领域。
数十年来，多细胞球体培养技术蓬勃发展，然而新手操作起来还是会存在一些技术难点。我们整理了比较普遍的几点供大家参考：
难点 1：细胞因子低活性导致多细胞球体诱导生长失败
解决办法：加入具有安全性、有效性和一致性的高质量重组细胞因子。
难点 2：细胞换液导致细胞丢失及成像扭曲
解决办法：使用 U 型板底减小细胞与板底的接触；还可以选择换液比较方便且涂层更坚固的 96 孔板培养 3D 细胞。
难点 3：频繁换液和洗涤导致水凝胶表面损坏，细胞贴壁生长
解决办法：选择耐刮擦表面的培养耗材。
做 3D 细胞培养的科研人，一定了解水凝胶，它由于其特殊的结构和性能，一直被作为 3D 细胞培养有利的培养基质，但水凝胶存在成胶时间长或结构疏松、原位凝胶形成控制性能差等缺点，也极大地限制了其进一步应用。
这几年大家总结出了各种经验，不断优化实验流程，促进细胞成球。其中耗材的优化是很具有现实价值的一步。莎斯特研制的专门针对 3D 细胞培养的 BIOFLOAT™ 96 孔板大大地帮助了科研人，它的优势也很明显：
快速成球：BIOFLOAT™ 表面能够确保快速成球。细胞系、细胞类型不同，成球时间也不同，一般需要 2～24 小时。实验测试表明，相比其他类似产品，相同细胞在相同培养条件下，在该表面上更易成球（图 1）。
图 1：BIOFLOAT™ 细胞培养板促使细胞快速成球。每孔接种 200 微升细胞密度为 30000 个细胞/毫升的 3T3 细胞悬浮液。
重复性高：借助 BIOFLOAT™ 表面形成的球体具有极高的圆形度，由此可实现数据的高度一致性。不会形成沉积物、卫星团聚体或不规则聚合体，从而确保了极高的可重复性（图 2）。
图 2：BIOFLOAT™ 表面形成的球体具有极高的圆形度。每孔接种 200 微升细胞密度为 30000 个细胞/毫升的 3T3 细胞悬浮液。数值越高，代表球体越圆。数值 1 代表正圆形。
BIOFLOAT™ 表面具有高度抗粘附特性。体外培养的贴壁细胞，无法粘附于培养容器表面，细胞与细胞之间更容易形成接触。涂层坚固，非常便于日常实验使用，表面特性不会因为多次洗涤或移液器吸头碰触而受损（图 3，4）。
图 3：BIOFLOAT™ 细胞培养板与无涂层细胞板培养细胞效果对比。将 3T3 细胞以不同的细胞密度接种在 BIOFLOAT™ 细胞培养板上，无涂层培养板组作为对照。三天后通过显微镜记录结果，可以明显看到 BIOFLOAT™ 上已成功形成球体且球体大小可能受到每个孔细胞数量的影响。相反，在无涂层表面上，3T3 细胞可以贴壁生长，但不能形成球体。
图 4：使用标准移液器吸头轻微刮擦孔底（中等压力刮擦一遍），再用大力刮（约 30 秒）。每孔接种 200 微升细胞密度为 30000 个细胞/毫升的 3T3 细胞悬浮液。
（左右滑动查看）
适合难成球的细胞类型培养：得益于 BIOFLOAT™ 细胞培养板表面的可靠质量，即使是难度高的细胞也可培养出完美球体，比如原代肝脏细胞培养（图 5）。
图 5：BIOFLOAT™ 细胞培养板培养原代肝细胞，第八天就培养出相对完美的球状原代肝细胞。
与 2D 培养相比，多细胞球体培养模型通常被认为更具有生理相关性的系统。多细胞球体能够准确地反映复杂的体内微环境，并且成功地应用于诸多研究领域，如干细胞生物学研究、抗病毒药物学研究、癌症生物学研究、神经生物学研究、胰腺研究、肝毒性研究和肾病学研究等。上述研究彻底地改变了学界对细胞在培养和体内行为的理解，对于人类攻克重大疾病具有重要的指导意义和参考价值。
BIOFLOAT™ 培养板具有帮助细胞快速成球、重复性高、适合难成球细胞类型培养的特点。对细胞培养的新手也很友好，无需离心，换液方便，不惧刮擦！你确定不 pick 一下？
内容策划：王丹琦
内容审核：朱卿
题图来源：莎斯特
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