近年来免疫学研究风生水起，成了 CNS 的常客！不少人只知道免疫火，却小看了这免疫学实验的坑坑洼洼……
前两天师弟在免疫分型实验上翻车了，原来是流式分析术检测细胞时，细胞分群异常，可怎么办呢？
一路升级打怪的大师兄可不能放着不管，精心总结了经典免疫实验的避坑指南，供大家参考。
师兄
细胞分群异常，这种情况原因可能以下几种：细胞染色上机检测时存在细胞粘连/细胞团；制备单细胞悬液时，细胞裂解或破裂；存在细菌污染。
因此我们制备单细胞悬液时，应温和处理细胞；用胰蛋白酶消化组织时注意时间，避免消化过度，同时进行死细胞染色（如荧光染料 7-AAD）。操作过程中注意试剂耗材的清洁，防止污染。
免疫实验有问题，用好工具很重要~在丁香实验小程序可以在线提问，你的问题可以被更快解决～点击下方卡片，提出你免疫实验中的小困惑吧！
免疫学中常见的细胞实验可大致分为三类：
基础研究：细胞增殖、免疫分型、免疫细胞激活与分化、细胞健康与凋亡等
细胞功能：免疫细胞杀伤、吞噬与清除作用、NETosis 等
药效评价：趋化/迁移、抗体内化、病毒感染等
最常见、「坑」最多的实验莫过于细胞增殖、免疫分型、免疫细胞激活与分化和细胞杀伤实验。那我们就来看看大师兄在免疫实验避坑指南给出了哪些建议：
1
细胞增殖看数量、重消化
无论你是 MTT 还是 CKK-8 法检测细胞活性，一定要把握好细胞消化的时间，消化过度严重影响细胞活性；接种细胞时尽量设置细胞浓度梯度或预实验摸清细胞浓度，细胞密度过大或过小均不利于细胞生长。
2
细胞分化「拼」状态
T 细胞活化和分化是研究细胞疗法的重要一环。良好的细胞状态可使实验事半功倍，细胞分离过程中一定要冰上操作，刺激培养时观察细胞成团情况，密度过高时及时吹散细胞，更换培养板和培养基。
3
「巧」测细胞杀伤效应
在肿瘤免疫学研究中，检测细胞毒性T淋巴细胞（CTL）生物活性及杀伤效应至关重要。常用的检测方法有多种，如酶联免疫吸附剂测定法（ELISA）、酶联免疫斑点实验（ELISPOT）、荧光测定法和死/活细胞染料实时监测法。各有利弊，依据实验目的做出最佳选择。
除了以上重点分享的实验细节和问题，我们肯定还遇到过其它各类各样的免疫实验问题或困惑。俗话说：实验不停，「翻车」不止。丁香实验向全体科研人员发出邀请函，邀请大家参与免疫提问活动：
科研提问活动 · 免疫专场
活动时间：3 月 6 日～3 月 19 日
主题：免疫相关科研实验
活动期间，只要在丁香实验平台上抛出你的免疫实验问题，就有机会能得到
科研帆布袋、
胶囊伞、
无线鼠标等实物奖励，还可获得丁当虚拟奖励，可在丁香商城兑换心仪的礼品哦～怎么才能获得这些奖励呢？轻松 2 步就能拿奖品
Step 1：
点击下方小程序进入丁香实验问答广场，点击底部的蓝色按钮「我要提问」输入想问的免疫实验问题，选择关联「免疫领域」的实验，点击提交。
（点击大图查看提问指导）Step 2：
等待自己的提问发布后，扫码或者戳底部原文链接填写地址👇，坐等奖品发货就这么简单！
（长按扫码，填写收货信息）获奖攻略
①提交真实的免疫实验问题，通过审核且在前台发布后，视为成功参与。
②按照提问通过审核的个数，发放如下奖励：
前 50 位提问：丁香实验定制帆布袋发布 3 个提问：胶囊伞
发布 5 个提问：无线鼠标（伞与鼠标不可兼得）
欢迎大家将自己的提问，分享至自己的实验室群、学习群等科研人聚集地，帮助有相同实验问题的同学，一同查看解决方案哦～
举办活动的初衷是为了帮助大家解决科研实验问题，如果系统识别到恶意刷榜挤占榜单，非科研实验问题，一律不予发货哦，请大家公平参与！
当然不仅是免疫领域，只要在丁香实验问答广场上提科研问题，都会得到围观和解答，不仅仅是参与活动领取奖励，还能得到学霸天团的答疑解惑，一举多得！
即日起到 3 月 19 日都可以参与活动，奖品有限，快来参与吧！
*说明：1、活动最终解释权，归丁香实验所有；2、所有活动数据公平公正公开，任何违规操作刷榜行为，一经发现，将取消活动参与资格，并封禁账号，请诚信参与活动；
3、活动奖励，将在 3 月 19 日活动结束后 14 天内，统一安排寄送，请耐心等待；4、此次活动奖励：前 50 位发布提问可获得丁香实验定制帆布袋 1 个；成功发布 3 个提问可额外得胶囊伞 1 把；成功发布 5 个提问可获得无线鼠标，不与胶囊伞兼得。
内容策划：王丹琦
内容审核：杰西题图来源：自己做的
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