文末可领取免费科研入门教学资源IHC/IF 都是用于定位检测抗原表达的免疫检测技术，免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合来显示目的蛋白。
主要包括蛋白和一抗结合，其次是带有荧光基团的二抗识别并结合一抗，荧光显微镜下即可观察到荧光。
丁香实验特别为大家准备了免疫内容专题，点击下方即可收藏订阅：
技术简单直观，但影响最终检测结果的变量非常多，且需要多次调整变量。
具体到很多小细节，例如选择何种方法来保存；固定该用哪种溶液；如何选择最合适的一抗；抗原修复具体该用什么样的方法及条件等等一系列的问题。
很多同学没上手之前只知道诸多细节变化会导致结果不佳，但却没想到也有可能是被污染了！
而且一旦实验过程涉及污染，极有可能：
- 1. 信号弱或无信号，染色细胞过少
- 2. 背景过高（较为常见）
- 3. 细胞呈扁平状
- 4. 细胞模糊，封片剂明亮
- 5. 整个细胞片都出现荧光亮点
1. 准备生长状态良好的细胞，尽量避免使用贴壁性能不好的细胞进行免疫荧光实验，以免后续的漂洗操作引起细胞脱落（虽然少数实验需要使用这类细胞或者悬浮细胞进行免疫荧光观察）。
2. 合适的实验试剂，例如选择更新鲜的固定液和封闭液，以及适宜的抗体稀释比例。- 3. 合适的操作器具和环境，洁净的试验环境和一次性的实验器具能尽量减少携带污染源产生。
免疫相关 protocol 分享
免疫组化染色实验（IHC） protocol
冷冻组织及切片的准备实验
双重染色法免疫荧光组织化学染色步
组织免疫荧光实验 （IF）
丁香实验的更多问题还在等你发现呢还不赶快上车？👇👇👇
策划｜蛋黄排版｜77
图片｜丁香实验设计团队