流式细胞术实验是实验室常见的基础实验，因为涉及的知识复杂、影响结果的因素多，所以很多新手小白对流式无从下手，出现问题也难以解决。新学期到了，新来的师弟对流式实验一窍不通，半个月过去了，还是一筹莫展。
师姐
师弟，你的流式实验结果处理好了吗？还没发给我看
师姐，我画门到 CD4/CD8 细胞不分团，阳性对照也没有。
图源：自己做的
师弟
师姐
看样子像是抗体用错了，或者配色有问题。
这次实验用的流式抗体放了一年多了，会不会失效了？
师弟
师姐
流式实验是一项复杂精细的实验，这种问题怎么不早点反映呢？选择流式抗体不仅活性要好，还要满足靶标特异性和反应种属性。重新买抗体吧！（文末更有惊喜好礼，欧舒丹、蓝牙耳机、iphone 等你来赢！）
除了要慎重选择抗体，了解如何进行荧光配色，最大限度地减少对补偿和重叠的调整，也是流式实验的重点问题。在此我们列出了以下四点原则：
（1）了解可供使用的流式仪的配置，如有哪些激光器，有哪些滤光片通道。充分利用仪器允许的全部荧光染料，尽量选用多激光激发。
（2）了解荧光染料亮度和样品的抗原表达量，使染料的亮度与抗原密度匹配。一般遵循的原则是，把相对亮度高的荧光染料搭配表达丰度低的标记物，而相对亮度低的荧光染料搭配表达丰度高的标记物。
（3）还要注意光谱重叠的影响，共表达分子使用不同通道的荧光染料，避免荧光补偿。这里推荐使用光谱查看器来了解每个通道内每种染料的荧光重叠。
来源：Bio-Techne
（4）当然，选择优质的特异性抗体是实验成功的根本保证。在设计多色流式 panel 时，重要的是要了解仪器的配置，以及如何最佳地组合多种荧光染料，以最大程度地减少光谱重叠、提高结果的准确性。
为了方便大家更好地设计多色流式 panel，我们也将常用荧光染料整理成了表格，供大家参考：
来源：Bio-Techne
总之，流式实验需要注意的因素非常多。选择优质的试剂产品则会帮助您获取更好的实验结果。Bio-Techne 开学有礼，冲刺「锦鲤」！超多优质产品和福利促销等你来选择。
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• 本次促销活动最终解释权归 Bio-Techne 所有
内容策划：邹礼平
内容审核：陆雯芸
题图来源：图虫创意
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