文末可领取免费科研入门教学资源
相信做 qPCR 实验的研友经常会碰到以下令人抓狂的时刻：
1. 三个重复的 Cqmax 和 Cqmin 能差到两个循环；
2. 提的样本中总是含有很多 PCR 抑制剂，导致 Cq 值偏大；
3. 极低丰度样本的 Cq 值总是游走在 40 和 N/A 边缘，让人崩溃；
绝对定量时需要的标准品既没有商品化，自己制备起来又很费时费力，数不胜数的坑，等着有人来跳……
如果你也在为此烦恼，本文整理了一些关于 qPCR 实验方法、注意事项和常见问题处理等，帮助你更好地完成实验。
准备工作
如果你准备做 qPCR 实验，我想最开始肯定要考虑引物设计的问题。如何得到想要的引物设计方法和引物序列？
做 qPCR 之前，你需要做这些准备
做 qPCR 之前，你需要做这些准备
做 qPCR 之前，你需要做这些准备
实战经验
qPCR 实验中碰到的难题无非是重复性差、扩增易受抑制、灵敏度低和需要标准曲线等。
5 年技术实操老师亲授：qPCR 实操篇
在操作过程中，需要根据所用 MasterMix，模板和引物的不同进行优化，达到一个最佳反应体系。在反应体系配置过程中，又有哪些注意事项？
qPCR 常见问题及其分析
所有做过 qPCR 的人都熟悉那个很复杂的公式。什么 sampl A、什么 sampl B、什么 target、什么 Reference 。实验当中，到底哪个参数充当 Reference 的角色？
qPCR 的 8 条经验分享
更多 qPCR 实验相关内容，点击下方小程序免费查看，还能一键订阅，有更新第一时间收到通知。
如果你是实验小白可以收藏、转发文章，在做实验的时候按照流程一步步操作。如果你是师兄师姐，也可以把本篇文章分享给师弟师妹们！
实验方法免费看、实验问题在线问点击进入丁香实验小程序👇👇👇
策划｜卡卡题图｜自制