
推荐点进来的小伙伴,首先订阅收藏丁香实验推出的「PCR 实验」专题:
内含多种 PCR 实验的 protocol,收藏起来做实验不慌:
一、实验中的一些好习惯
1. 加入试剂之前,把它混匀一下,以免放置时间长了浓度不均
2. 移液枪用完之后要归到最大计量的位置,防止久而久之弹簧失去弹性
3. 一定要记着关水浴箱,切记切记
4. 多和大家讨论,同时多关注别人讨论的经验,这几乎是最快提高的捷径了
5. 所有的试剂都自己配,出了问题才好找原因
二、常用的 RNA 酶抑制剂有:
1. 焦磷酸二乙酯(DEPC)
2. 异硫氰酸胍
3. 氧钒核糖核苷复合物
4. RNA 酶的蛋白抑制剂(RNasin)
5. 其它:SDS、尿素、硅藻土等对 RNA 酶也有一定抑制作用。
因为 DEPc 不加选择的修饰蛋白质和 RNA,因此在分离和纯化 RNA 过程中不能使用,而且它与一些缓冲液(例如 Tri)不能相容。
在所有 RNA 实验中,最关键的因素是分离得到全长的 RNA。而实验失败的主要原因是核糖核酸酶(RNA 酶)的污染。
RNA 酶可耐受多种处理而不被灭活,如煮沸、高压灭菌等。研究人员造成的污染 RNA 酶最主要的潜在污染源是研究人员的手。因此进行 RNA 实验时应勤换手套。
那无处不在的 RNA 酶污染,如何有效避免呢?
「防止RNA酶污染的措施」
丁香实验推出「 PCR 专题」,帮大家解决实验中常见问题:
PCR 污染与解决对策
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策划制作
策划:王琴
配图:丁香实验设计团队