收藏!如何进行细胞冻存、解冻方法以及细胞计数?

2023-01-05 18:37 来源:微信公众号 - ShengWuXueBa 作者:生物学霸
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一、细胞冷冻保存


冷冻保存方法:


1. 传统方法:冷存管置于 4℃ 10 分钟→ -20℃ 30 分钟→ -80℃ 16~18 小时(或隔夜)→液氮槽 vaporphase 长期储存。


-20℃ 不可超过 1 小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入 -80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。


2. 程序降温:利用已设定程序的等速降温机以 -1~-3℃/分钟之速度由室温降至(-80℃ 以下)-120℃,再放在液氮槽 vaporphase 长期储存。适用于悬浮型细胞与 hybridoma 之保存。


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细胞冻存保存与活化

详细方法与步骤(精选干货)

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二、细胞冷冻活化


1. 冷冻细胞之活化原则为快速解冻,以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害,导致细胞之死亡。


2. 细胞活化后,约需数日,或继代一至二代,其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产生单株抗体或是其它蛋白质)。


具体的活化步骤,点击即可查看7 步教你把冷冻细胞活化


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编辑: 王凯

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