从 1868 年弗雷德里希·米歇尔发现 RNA，到 1958 年中心法则的建立。RNA 作为蛋白质和 DNA 间的桥梁，其重要性显而易见。获得高质量的 RNA，对于常见的分子实验非常重要。但是 RNA 本身易降解，且环境中 RNA 酶广泛存在，使得 RNA 的提取纯化就显得很棘手。
因此 RNA 提取成为了科研人需要直面的一个挑战。提取前不仅需要提前准备多种试剂耗材，而且实验更是环环相扣，一步都不能出问题。很多刚刚接触的新手，都会做的手忙脚乱，结果也是得率奇低。看着同组师兄师姐的操作干净利落，丝滑万分，眼里只剩下羡慕的目光。「难道说是我做的不够快吗？只要我提取的够快，RNA 酶就追不上我吗？」
当然没有这么简单，RNA 关注点在细节，而不在快不快上！本次从样本采集到提取，整理了常用知识点供大家学习，加以实践练习即可搞定 RNA 提取。
RNA 样本的采集
在新鲜的组织在离开活体或者原本的生长环境时，需要立即并快速的将样本放入液氮中冷冻，或者后续长期在 -80 ℃ 中保存。并且因为样本中存在的 RNA 酶在离开活体时即会开始降解 RNA。所以，在样本采集时建议加入 RNA 稳定保护剂，尤其在野外进行样本采集等无速冻环境的场所，使用 RNA 稳定保护剂就显得格外重要。
样本破碎
样本破碎是 RNA 提取的关键步骤，首先需要为不同的组织使用不同的破碎方法，如何选择合适自己的破碎方法，可以参考下表。其次要注意该过程中，要避免外源性的 RNA 酶对实验的影响，需要使用无酶的枪头、EP 管、匀浆器的钻头等器材，实验环境也需要保证是无 RNA 酶。
RNA 提取注意事项
1
高温高压不能除去 RNA 酶，耗材需要使用 DEPC 水处理，或者直接购买无酶的产品；当然，有条件的话，还是建议采用专用于 RNA 实验的无 RNase 一次性耗材，不仅更加安全便捷，也能防止 DEPC 残留对部分下游敏感应用的影响。
2
提取的整个操作建议在冰上进行；
3
过程中需佩戴口罩和新手套，对台面以及周围环境进行灭酶处理，尽量在超净台中进行操作；
4
如果使用了 Trizol 裂解液，要小心使用避免溅到身上，台面上 Trizol 也要及时清理；TrizoL 中的苯酚具有腐蚀性且有刺激性气味，氯仿属于二类易制毒化学品有刺激性气味，务必避免实验人员与有毒试剂的直接接触。同时得到的 RNA 容易有 DNA 或有机溶剂的污染或者降解。如果可以的话，建议使用专门的试剂盒来提取。RNA 浓度低时，采用低温沉淀，并延长沉淀时间。
注意全流程把控，RNA 提取再也不会手忙脚乱，干劲利落的拿下绝对没问题。
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内容策划：邹礼平
内容审核：周育红
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