最近,实验室里最勤快的小王越来越沉闷了,一次路过他的电脑桌,居然瞥到了他的博士退学申请。课题已经做了四年,同届的同学大多都已经发表文章准备毕业了,而他还在一直原地踏步,不断重复又失败。看到他的退学申请,大家即感到无奈又担忧起各自的课题进展。
博士生抑郁风险不仅是一个精神医学或心理学领域的论题,也关乎我国高层次创新人才的培养质量[1]。2019 年,陈祉妍带领中国科学院心理研究所科研团队对我国研究生群体的心理健康状况进行了调研。结果显示,35.5% 的被调查研究生可能有一定程度的抑郁表现,60.1% 的被调查研究生有焦虑问题[2]。研究发现,沉重的学业压力导致了研究生群体过长的工作时间,而过长的工作时间对心理健康有着负面影响。
在日常实验中,最让大家头疼的莫过于很多实验需要摸索着进行,要花费大量时间和精力去不断试错和纠正。尤其是从事细胞或动物实验的基因调控研究这类难度较高的实验,不知道如何选择合适的递送工具,辛苦几个月也不一定能拿到一个阳性结果。比如当你需要对一个基因进行调控(过表达/干扰/敲除)时,可能会遇到以下几个问题:
构建质粒的成本和花费都相对较低,是否选择质粒就可以了?
我做实验的细胞适合用什么病毒侵染?
慢病毒、腺病毒和腺相关病毒应该怎么选择?
基因长度太长,超过了慢病毒载体的容量怎么办?
不要慌,针对这些问题,汉恒生物不仅为大家准备了《工具病毒载体选择指南》,更有技术大牛在线回答问题,为您解决困扰。现识别下方二维码,不仅可以得到老师的手把手教学,更有机会领取 1,000 元病毒优惠券(限量 50 份),为您的病毒实验保驾护航!

根据实验目的来选择适合的基因操作工具,不仅能节约时间和成本,更能让基因调控效率翻倍。汉恒生物整理的《工具病毒载体选择指南》,或将能为您的实验提供帮助:
首先,需要考虑研究对象是细胞还是动物,如果是细胞实验,可选择慢病毒或者腺病毒;如果是动物实验,通常选择腺相关病毒(AAV)来实现精准的基因递送;
其次还需要考虑载体的表达时间与实验观察时间是否相符、其可容纳的基因片段大小与目的基因大小是否匹配等因素。详见下表:

「质粒」可以快速开始表达,但只能瞬时表达,并且对于很多细胞的转染效率较低;如果想要构建稳定细胞系,维持稳定表达,那就非「慢病毒」莫属了;「腺病毒」感染效率高、载体容量大,对于很多原代细胞和悬浮细胞都能达到较高的感染效率;如果是动物水平的基因调控,优选「腺相关病毒(AAV)」, AAV 具有多种血清型,对不同的组织细胞的转染效率存在差异 ,再搭配组织特异性启动子,则可以针对不同的组织器官实现靶向高效的基因递送。如果目的基因片段过长,AAV 容载受限,或是想要尽快进行感染后的检测,也可以使用纯化的腺病毒进行动物实验。
详细的 AAV 血清型和特异性启动子选择指南也可以识别下方二维码了解:

看了上面的攻略,对于工具载体的选择有了更清晰的认知,如果还有其他疑问,或是想要更深入的了解,也可以在丁香通平台点击在线询价,发送相关信息,汉恒的技术工程师会尽快与您取得联系.
内容策划:邹礼平
内容审核:朱晓芳
题图来源:图虫创意
参考文献:
[1]. 程猛,李嘉怡.象牙塔尖的忧郁——博士生抑郁体验的叙事研究[J].教育研究,2022,43(07):88-103.
[2]. 心理健康蓝皮书”—《中国国民心理健康发展报告(2019-2020)》
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