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今天丁香实验给大家整理了流式细胞术从「实验设计」到「结果分析」的全流程 protocol，建议转发收藏！
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第一步设计你的流式细胞实验很多同学在实验设计的时候就埋下了隐患，最常见的问题就是——对照设置不合理，最后导致整体实验失败或数据不理想。
流式对照至少有 5 种。
生物学对照，空白对照，同型对照（Isotype control），补偿对照（也叫单阳性对照）和 FMO 对照，主要目的是为了避免出现的假阳性或假阴性结果。
更多流式实验相关学习内容，可以戳下方文字查看哦~
📕 流式实验如何配色？
第二步细胞悬液样本制备
流式细胞术的分析检测建立在单个细胞的基础上，所以制备合格的单个分散的细胞悬液是非常关键的一环。
对不同来源和不同形式的样品，根据各种样品的特点可选择不同的分散方法。
01、单层培养细胞、血液、各种脱落细胞等样品
标本经过简单的制备悬液，离心分离处理，就可以得到分散较好的单个细胞悬液，是理想的流式细胞术检测对象。
02、不同组织来源的实体组织标本
采用酶消化法、机械法和化学试剂处理法来分散细胞。
👉点此查看流式细胞样本制备 protocol👉点此查看流式细胞样本制备 protocol👉点此查看流式细胞样本制备 protocol
第三步流式检测操作流程
实验目的不同，检测的数据也各不相同，以下是一些常用实验方法，建议收藏：
🧪 Annexin V 荧光双染细胞凋亡检测🧪 流式细胞仪检测细胞周期🧪 流式细胞仪检测细胞内因子🧫 流式配色基本原则🧫 流式细胞表面染色步骤🧫 用流式细胞术计数网织血小板
很多同学第一次操作流式细胞仪器的时候非常紧张，生怕哪一步做错，弄坏了上百万的实验设备
仪器的操作确实有很多讲究，比如：
「检查鞘液桶及废液桶：鞘液桶应含有足够的鞘液，废液桶应在上次使用后清洗干净
」「使用后的清洗 所有样品测定完后，要进行仪器的清洗
」流式细胞仪器使用方法和流程已帮大家做好梳理：
👉点此查看流式细胞仪使用操作👉点此查看流式细胞仪使用操作👉点此查看流式细胞仪使用操作
第四步流式检测结果分析
实验结果图通常有一维直方图、二维点图、等高线图、密度图等几种。
由数据还可以做出曲线进行定量分析，不过很多新同学很难读懂图片代表的含义
其实，不管是操作细节，还是实验图片，大部分人遇到问题，还是会先请教自己的导师、师兄师姐，但是即便如此，有时候也只能得到片面的解答，不能知悉全貌，甚至还是在流式的「坑」里来回打转……所以，对外要学会「借力」，多听听不同的建议和声音。
这一次，我们特别请到了伊莱瑞特的专家团们，来到丁香实验的问答广场上，对大家发布的免疫类问题，进行积极解答，得到解决方案的同时，还能领取科研周边礼品哦👇
（点击图片立即参与活动）活动时间：10 月 10 日 ~ 11 月 6 日
Step 1：👇戳小程序，进入丁香实验问答广场，点击蓝色按钮【我要提问】输入问题，选择对应的免疫的实验，点击提交。
（点击大图查看提问指导）Step 2：等待自己的提问发布后，扫码或者戳底部原文链接填写地址👇，坐等奖品到家
就这么简单！
（长按扫码，填写收货信息）此次活动，将按照成功发布提问数发放对应奖励：
（礼品数量有限，先到先得） 欢迎大家将自己的提问，分享至自己的实验室群、学习群等科研人聚集地，帮助有相同实验问题的同学，一同查看解决方案哦~举办活动的初衷是为了帮助大家解决科研实验问题，如果系统识别到恶意刷榜挤占榜单，非科研实验问题，一律不予发货哦，请大家公平参与！
有专家大牛坐镇，还能领取惊喜好礼，从现在起到 11 月 6 日都可以参与活动哦，快快来参加吧👇
*说明：1、活动最终解释权，归丁香实验所有2、所有活动数据公平公正公开，任何违规操作刷榜行为，一经发现，将取消活动参与资格，并封禁账号，请诚信参与活动
3、活动奖励，将在 11 月 6 日活动结束后 14 天内，统一安排寄送，请耐心等待4、此次活动仅前 150 位发布提问可获得实验笔记本 1 本，成功发布 2 个提问，可获得小鼠 U 盘 1 个
策划｜丁香实验团队题图｜自制