心态崩了!同样是做 PCR,为啥结果总跟师兄差这么多?

2022-09-30 19:36 来源:微信公众号 - ShengWuXueBa 作者:丁香实验
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实验室里,看着师兄做的 PCR,扩增效率高,电泳条带完美,再看看自己的,辛苦做半天,感觉反应得挺好,结果一测假阳性……问题到底出在哪儿呢?

「是不是引物设计有误,特异性差?」「酶量多少,循环次数不够?」「退火温度不合适?」
相信很多伙伴也遇到过各式各样的问题,我们在 PCR 实验中碰壁时,会下意识地去分析反应体系内的因素,但常会忽视实验中耗材也有着重要影响。
 PCR 结果不对耗材可能是本质原因
因 PCR 反应的精密度,使得在此过程中,耗材和仪器的辅助作用非常重要。
如 Tip 的准度和残留度,PCR tube 的密封性及热敏感度,所有耗材的外源 DNA/RNA 酶以及细菌的污染程度……以及在此过程中仪器使用的便捷度等,都是我们要考虑的因素。
选择合适的耗材是实验成功的重要因素
可是 PCR 耗材类型众多:8 连管、低容管、标准管、无裙边、半裙边,全裙边,升孔缘等一系列的 PCR 及 qPCR 板,选择起来非常困难,在这中间存在许多具有共性的问题,但好在,这一次,丁香实验请到了 SARSTEDT——各种耗材的差异、优势、特点都给大家总结好了,快来「抄作业」!

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  • 孔壁薄,厚度均匀,热传递速度快,结果可靠,重复性强。
  • 孔缘凸出,可防止交叉污染,也便于封膜安全密封,从而防止蒸发。
  • 采用黑色字母数字标签,有助干在手动加样的情况下,快速识别样本并追溯。
  • 洁净环境生产,并委托第三方实验室进行测试。
  • 对每个孔都进行 100%密封性测试,确保样本处理安全性。
 

超高洁净度全裙边PCR板

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特点与优势:
  • 精心设计产品与模具构造,确保壁厚均匀。
  • 选用优质原材料(如医用级材料)。
  • 在洁净室环境中自动化生产。
  • 严苛的质量检查(例如100%密封性测试)。
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编辑: 王凯

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