PCR，实验室必备实验，从基因鉴定到信号通路验证，几乎每周都要 P 个三五次。
除了常用的 RT、QPCR，本文还详细整理了其他几种 PCR 的选择与区别、实验方法和常见问题汇总，并做成专题。
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实验经验、问答每周更新不错过
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多重 PCR
普通 PCR 仅对单一基因进行定性或半定量，对多个基因进行检测时需要分为多个独立体系进行扩增，虽操作简单，但工作量大，耗时耗力浪费样本及试剂。
而多重 PCR 同时能够比对多个扩增子，联合应用 RT-PCR 技术还可达到定量的目的。不仅如此，多重 PCR 还被用于靶向建库测序技术中的文库快速构建。
多重 PCR 常被用于：病原体识别、高通量 SNP 基因分型、突变分析、模板定量、连锁分析、RNA检测、法医研究。
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原位杂交 PCR
原位 PCR 常用于研究疾病的发病机理、临床过程及病理的转归、分子生物学、细胞学、分子病理学及临床诊断领域等。
具体应用举例如下：
1.在样品中目标核酸含量低，原位杂交法灵敏度不够时，可采用原位 PCR 以高特异性、高灵敏度检出样品内的微量核酸；
2.确定目的基因或病毒的亚细胞定位；
3.可用于确定拥有某目的基因的细胞数量或百分比，如协助确定感染某种特定病毒的细胞数量，或具有激活的病毒基因表达的细胞数量，具有肿瘤基因的细胞百分比，确定转移性肿瘤的来源等；
4.快速鉴定细菌物种等等。
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RACE 实验
cDNA 末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends, RACE)是一种基于逆转录 PCR从低丰度的转录本中快速扩增 cDNA 的 5' 和 3’ 末端的有效方法。
需要得知 cDNA 两端序列信息时，或仅利用 poly(A) 尾无法获得全长 cDNA 时，可使用 RACE技术快速且特异性的获得 cDNA 全长序列。
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以上内容来自【📱 最常用 PCR protocol 合集】实验专题，如果你是实验小白可以收藏、转发文章，在做实验的时候按照流程一步步操作。
好了，基本的操作部分以及注意事项就这么多，希望能帮到大家。学到这里，别忘了参与由丁香实验主办的 PCR 学霸答题挑战赛哦，检验学习成果的同时，还能领取加湿器、喝水烧杯、实验记录本、纪念币等科研好礼哦！
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