警惕!好好的细胞这么操作,真的会全军覆没

2022-09-23 22:33 来源:微信公众号 - ShengWuXueBa 作者:生物学霸
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实验室突然要养几十盘贴壁细胞,消化细胞、更换培养基,一通操作下来好几个小时,累个半死不说还经常污染。组会上导师大发雷霆,要求尽快找出污染原因。


小师弟

怎么办?被污染问题折腾到怀疑人生,对养细胞都产生抵触逃避心理了…

这批细胞污染经常是出现在铺板和换液的时候,是不是咱们用的培养皿和培养基有问题?

师兄

小师弟

耗材都是全新无菌的,培养基和血清也是新的,隔壁实验室跟我们一样细胞也没问题,按理说不应该啊......

整个实验操作也没什么问题,大批量做下来还是出现了污染

大师姐

小老师

我看咱们组的那台真空吸液仪比较老了,我很早之前用的时候会因为吸力不够,手柄漏液。如果实验前不注意清理,可能会引起污染,你们觉得呢?

其他人


怪不得细胞怎么都活不了!真空吸液系统,真能称得上细胞房里的「双面间谍」。它常用于吸取和更换细胞培养基,可以大大减少实验的工作量。而我们往往会忽略,它也是造成细胞污染的隐患。常规的真空吸液系统主要分为三个部分:真空泵,收集过滤系统以及吸液手柄。这三部分其实都能导致污染,不信你且继续看:


存在隐患的真空泵


一些常规的真空泵没有真空控制。会出现压力过低的情况,多用户同时使用时吸力不足,存在吸头滴液造成污染的风险;收集瓶中的废液还会因此出现蒸发,蒸汽在真空泵或者真空管路中发生冷凝,清理不及时就很可能滋生污染。此外一些真空吸液系统的真空泵没有外置的出气口,无法外接排气系统确保管道系统的安全性以满足更高的安全要求。

脆弱的收集过滤系统


传统吸液系统的收集和过滤系统,瓶身和管路多为普通的塑料和橡胶材质,无法保证密闭性和防摔性,无法做到高温高压灭菌;一些真空吸液泵还没有加装过滤器,无法有效的防止废液泄露气溶胶的扩散,长时间使用还很容易使管路内滋生细菌,造成实验过程的污染。

不够完美的握持手柄


真空吸液系统在操作时需要实验人员手持吸液手柄完成废液的吸取操作。常规的系统存在手柄形状设计不当的问题,长时间操作会加重手部负担,操作变形是实验结果受污染最终失败的重要诱因。一些手柄还存在无法与吸头完美贴合、吸头突然脱落的问题,一旦出现漏液就很容易造成污染;另外不使用时,一些手柄无法密封,也会造成液体滴落导致细胞污染。

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如果您已经在用某一款真空吸液系统,在细胞实验前,一定要检查真空泵是否有腐蚀生锈的痕迹、吸液系统的吸力是否正常、是否存在滴液的情况;收集瓶是否完好无破损,是否加装了过滤器、滤膜是否洁净以及检查管路系统是否有细菌滋生;最后检查吸液手柄与吸头的贴合度,检查是否存在漏液滴液的情况。通过对这几点的检查,看看是不是污染的来源。


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具有可靠高效的真空系统



配备经典化学隔膜真空泵 ME 1C,内部沾湿部件全部采用耐腐蚀的复合型氟塑料;极限真空 100 mbar,即使最低压力,也不会造成废液蒸发;且压力 150 mbar~850 mabr 8 档可调,支持 2 人同时操作;真空泵出气口外置,可通过排气管路接入生物安全柜排风系统,降低污染风险,实现对实验室环境和工作人员的最高防护。


稳固的废液收集过滤系统



收集瓶可选择 4L 厚壁 PP 瓶或 2L 硼硅酸盐玻璃瓶,两种收集瓶均可高温高压灭菌,真空防爆耐腐蚀;收集瓶和真空泵之间装有孔径为 0.2 微米的疏水性可高压灭菌滤膜,能有效防止气溶胶扩散,如发生溢流也可以很好地保护泵。


独特设计的吸液手柄



吸液手柄可以高温高压灭菌,采用和管路系统分离的设计方式,使得废液仅仅流经管路软管,在手柄处不会有残液留存,灭菌干净彻底;搭配了单道和八道手柄适配器,与吸头贴合紧密,吸液均匀;支持多种握持方式,有效缓解长时间握持的手部酸痛感。


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内容策划:王丹琦
内容审核:吴军

题图来源:图虫创意

文中图片由普兰德提供


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编辑: 王凯

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