| 第二次做，咿~结果差别这么大（同一份标本）怎么还有跳孔
| 第三次，决定做的认真一些，争取作到同一份标本，做两到三次，板间无差异……怎么这么难？！又失败了
ELISA 实验对初学者而言，如不注意实验操作过程中的各个环节，可能会出现白板，显色弱灵敏度低，花板无梯度背景高等现象。
（点击图片立即参与活动）1、白板现象：所有孔的颜色均为无色，即无信号呈现。| 可能原因：试剂已过保质期，不同批次稀释液交叉使用；洗板或者加样过程中，酶标记物被污染失活；洗涤液是浓缩型的，没有按比例进行稀释。
2、花板无梯度背景高：在进行底物TMB溶液显色后，酶标板中的孔有颜色但没有梯度，背景较高。| 可能原因：底物溶液TMB未置于阴凉避光处保存，实验前溶液已经变蓝；
孵育温度过高或者孵育时间过长，发生了较强的非特异性吸附。
3、显色灵敏度低：显色比较浅，即只有微弱的信号呈现。| 可能原因：洗涤液稀释倍数不符合要求，洗板次数过多，洗板冲击力过大，洗板浸泡时间过长；底物溶液TMB显色时间太短。
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