7 年前论文遭撤稿,只因动物实验做错这 1 步

2022-07-24 21:00 来源:微信公众号 - ShengWuXueBa 作者:草由八
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PLoS One 在今年年初发文,撤回了大连理工大学 7 年前发表的研究论文。 
其中原因正是该论文中不合理的使用麻醉剂以及不合理的实施安乐死的方法,违反了动物伦理。近几年,因违反动物伦理而被撤稿的文章不在少数。
今天将为大家一一介绍在动物模型制备过程中许多小的细节,避免这样不必要的错误发生!以下内容来自「小鼠造模与给药专题」,建议做动物实验的同学先收藏专题。
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如何选择麻醉药物、剂量?
从麻醉入手,很多科研小白在小鼠造模的麻醉药物选择都是根据实验室师兄师姐的 protocol 或者实验室现有条件选择,而自己本身并不了解各种麻醉药的使用情况。
水合氯醛
有些同学选择4%水合氯醛,0.1ml/10g,腹腔麻醉。然而根据国际和中国实验动物有关法规和标准,在实验动物的麻醉方法中,鉴于水合氯醛属于镇静,催眠以及抗惊厥药物,其作为麻醉剂效果差,刺激性强,毒副作用大会干扰实验结果,且有悖于实验动物伦理审查原则等问题,国际期刊普遍建议不再使用水合氯醛作为动物麻醉剂。
并且水合氯醛腹腔注射给药,会引起严重的腹腔黏连不适于术后长期饲养的实验动物。因此水合氯醛这个所谓“麻醉剂”已不再适合我们在制备动物模型时的使用。
戊巴比妥钠
我们再来说说另一种常见的麻醉药物,戊巴比妥钠:
  • 大鼠一般用0.3%戊巴比妥钠,以40-50mg/kg腹腔注射
  • 小鼠采用0.3%戊巴比妥钠,以50-60mg/kg腹腔注射
  • 一般麻醉时间在2-4小时左右

一定要注意戊巴比妥钠的浓度问题,若用浓度为 3%戊巴比妥钠,其浓度过高,稍有不慎就会造成实验动物麻醉死亡!
若在麻醉时不确定动物对于戊巴比妥钠的耐受程度,建议大家在首次腹腔给药时大鼠<40mg/kg,小鼠<50mg/kg,注意观察动物酌情追加。
乙醚 & 异氟烷
以上两种是我们在实验过程中成本较低,较常见的两种麻醉剂。若有条件,也可以选择乙醚,异氟烷等吸入性麻醉的方法,但要把握好气体流量,否则也会出现实验动物麻醉死亡现象。
异氟烷气体吸入式麻醉也是目前国际惯用的麻醉方式,成果易得到国际承认。当然在做气体吸入式麻醉时一定要做好房间的通风,做好口罩,护目镜等防护,保护好自己。

造模造成小鼠死亡怎么办?
造模后的术后护理也同样重要。麻醉剂也选好了,手术也很成功,为什么小鼠还是一个个死亡?
防止感染
若小鼠在造模中需要开腹等伤口出现,术后首要注意的就是防止感染,首先切口周围应严格用碘伏消毒。若要将小鼠放回笼子里,要保证笼内垫料干净,严格消毒灭菌处理,有条件的可以在垫料上铺一层无菌纱布,每日更换垫料,这样可以有效防止小鼠感染。
术后镇痛
也同样重要,术后切口的强烈疼痛也可引起动物死亡,可以对小鼠尾静脉注射曲马多,2.5mg/kg,对小鼠镇痛。
体温检测
术后对于实验动物的体温检测也同样重要,低体温休克是造模后造成动物死亡的主要原因之一,造模后可让动物趴在恒温加热板上,也可将动物放在笼内,用暖风机保暖。
同时,对于造模过程中造成动物脱水的,可通过计算补液量对动物适当补液,减少动物死亡率。
动物实验讲究很多,需要大家认真对待自己的实验小鼠,在收获结果的同时也要注意动物伦理。
今天给大家推荐【小鼠造模给药专题】,针对动物造模可能会遇到的问题进行解读,祝各位的小鼠都能带来稳定的实验结果。
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策划|Olaf
作者|草由八
配图|丁香实验设计团队

编辑: 王凯

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