CRISPR 技术自问世以来，就彻底地革新了基因编辑领域。借助该技术，研究人员能够改变病原体基因、修正人类缺陷基因及改良作物基因等，实现对生物体基因组的精确编辑。从全球首例基因编辑的婴儿诞生，到 2020 年诺贝尔化学奖的颁发，CRISPR 技术对生命科学领域产生了革命性的影响，为创新性癌症疗法作出巨大贡献，或能够使治愈遗传性疾病的梦想成为现实。
当前 CRISPR 已经成为了成熟的研究工具，研究人员设计和开发了多种 CRISPR/Cas 工具，它们具有更广泛的目标、更高的效率和特异性以及更高的精度。此外，CRISPR/Cas 相关技术也已扩展到通过引入允许精确基因修饰、控制基因表达、进行表观遗传改变等的功能元件来切割 DNA[1]。截止目前 CRISPR 相关技术已经在今年已经发表 4,000 余篇学术论文。
在实际的应用中，CRISPR/Cas9 虽然常见，但是作为工具使用仍然较为复杂。不仅需要对原理理解到位，还注意设计和操作环节。即使步步小心，实验中依然也会出现诸多问题，比如：
剪切总脱靶导致失败，却找不到优化方法；
gRNA 序列设计不合适，但是不知道如何优化；
CRISPR/Cas9 基因敲入效率太低，原因分析不出；
除了 CRISPR/Cas9 还有哪些系统可以选择匹配自己的实验。
解决以上这些问题，需要对 CRISPR/Cas 技术有深入的了解，熟悉引物设计、系统应用。为了帮助大家完成相关知识的升级，丁香园特邀汉恒生物高级技术支持陈艳林，为大家分享「CRISPR/Cas 全解，手把手教你实验设计与应用」，助力大家全面了解 CRISPR/Cas 的原理与应用。
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内容策划：康晋伟
项目审核：朱卿
题图来源：图虫创意
参考文献：
[1]. Liu G, Lin Q, Jin S, Gao C. The CRISPR-Cas toolbox and gene editing technologies. Mol Cell. 2022 Jan 20;82(2):333-347. doi: 10.1016/j.molcel.2021.12.002. Epub 2021 Dec 29. PMID: 34968414.
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