进入暑期，很多科研专业的同学，选择留校继续进行实验。今天，大师兄也特意给大家整理一波关于流式细胞术相关的疑难点！助力大家暑期实验顺利进行
如果你最近也在做相关实验，一定不要错过啦！（文末还有惊喜好礼哦
）Q：流式细胞仪上的 FL2-W、 FL2-H 分别是做什么的？
A：FL2-W 是只检测荧光的脉冲宽度， FL2-H 是指脉冲高度。通常在做细胞周期分析时应用，用于去除粘连细胞。
Q：6 孔板的细胞量能否做流式呀？
A：对于 6 孔板而言，每孔的表面积为10 cm²，依细胞种类不同在长满时达到的数量从 5*10 的 5 次方到 5*10 的 6 次方不等。6 孔板绝对没问题的！甚至 24 孔板也可以正常做。不过用于调试仪器参数的正常细胞要多准备一些。
Q：血液里的 mononuclear cell（除外红细胞，血小板和破碎的细胞碎片），能不能用细胞大小来 gating？
A：红细胞还是小一些，无法 100% 区分，但还是可用把大部分红细胞 gate 掉。其次，溶血也很重要，如果你的红细胞多的话。（我猜不少，如果用 Ficol 的话）。可以用氯化铵溶液，如 ACK（Lonzo）。
Q：细胞膜蛋白变化是用流氏检测好，还是要做 Western?
A：膜蛋白的提取，好像很费功夫，提取的不好，Western结果也就不可信。流式需要的抗体很少，流式能够检测阳性表达细胞的比例，Western能对总的表达定量，各有有缺点。
Q：培养细胞的 Bcl-2 及 Bax 蛋白的检测？
A：首先制成单细胞悬液，PBS洗涤后用胞内染色试剂盒（很多公司都有，其实就是固定剂加增透/打孔剂）进行处理，再进行抗体孵育标记染色，洗涤后上样。
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内容策划：丁香实验
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