科研界有个火了好多年的「明星」外泌体，它覆盖领域超广，涉足基础到临床各项研究，成了国自然、高分 SCI 的宠儿。
今年外泌体热度依旧不减，国自然中标数量 430 位居第四；外泌体方向的 SCI 发表两千余篇，10 分以上文章占比超过 11 %，也就是说每发十篇 SCI 就有一篇破 10 分。
如果你正愁申请国自然没头绪、或者想给自己的 SCI 的加加分，可以试试研究外泌体。
｜究竟什么是外泌体？
｜如何把它设计到课题中来？
｜如何结合临床并发表高分论文？
本文将为你一一解答，今天这篇内容来自【丁香实验-外泌体宝典】专题，每周更新外泌体干货内容，建议提前收藏。
被细胞抛弃的「小垃圾」
外泌体是由细胞分泌的直径为 30~150 nm 的小囊泡，主要在血液、尿液、脑脊液、唾液、乳汁、胆汁等各种体液中，曾被科研人认为是被细胞抛弃的「小垃圾」。
（图片来源：Thermo Fisher）后来被证实具有减少细胞凋亡、减轻炎症反应、促进血管生成、抑制纤维化、提高组织修复潜力等重要生物学功能。
由于特殊结构和功能突出，使得它成为近年来最有潜力的科研「明星」。外泌体的研究方向主要包括以下三个方面：
｜寻找疾病诊断和预后的分子标志物；｜揭示疾病发病机制；｜外泌体作为药物载体，实现靶向给药。
其中前两点是科研中常用「套路」，针对寻找分子标志物（例如核酸），通常的研究思路如下：
（点击图片：进入外泌体宝典查看更多内容）针对疾病机制研究，常见的研究思路如下（以外泌体 miRNA 为例）：
（点击图片：进入外泌体宝典查看更多内容）外泌体实验三步走
外泌体的实验包括：提取、纯化、鉴定这三步，每一步都有 2～3 种不同方法，大家可根据所在实验室的条件进行选择。
第一步：外泌体的提取
外泌体的样本来源主要有细胞培养上清、血清/血浆、尿液、腹水、乳汁、脑脊液、唾液、滑液等，其中细胞培养上清、血清/血浆、尿液是最常见的来源。
第二步：外泌体的分离纯化
外泌体分离方法有很多种，包括超速离心、过滤离心、密度梯度离心、免疫磁珠和商用试剂盒。
我们以外泌体纯化和分析之磁珠分选法为例，看看具体的操作如何？👉 点此查看：外泌体纯化和分析之磁珠分选法
第三步：外泌体的鉴定
外泌体鉴定是进一步研究外泌体功能和机制的工作基础。目前的鉴定方法主要包括透射电子显微镜（TEM）进行形态学观察、纳米颗粒追踪分析（NTA）进行粒径和密度分析、用 WB 进行蛋白标志物的鉴定。
👉 点此查看外泌体鉴定电镜法👉 点此查看：外泌体鉴定之 NTA：纳米颗粒跟踪分析技术👉 点此查看：外泌体鉴定之 Western Blot 电泳
外泌体应用指南与高分案例
在了解外泌体的背景、基础实验、常用思路后，给大家分享几个研究应用中的案例，帮助大家更好的设计课题。
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最后祝大家都能利用外泌体发高分论文！
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内容策划：Olaf文章配图：丁香实验设计团队