只会细胞实验,可以发 10+分的 SCI ?

2022-05-26 18:32 来源:微信公众号 - ShengWuXueBa 作者:丁香实验
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细胞实验优点太多了:造模快速、玩转机制、周期超短。

如果你是高校基础医学部的同学,或者身在临床想突破高分文章的临床医生不妨试试细胞实验,10 分 SCI 也能快速拿下,比如下面这两篇:

这篇发表在 Nucleic Acids Res 杂志上的论文是天津医科大学肿瘤研究所的研究结果。主要做两个分子之间的调控模式,再从动物和细胞水平研究功能,该期刊影响因子已达到 17 分。

另一片发表在 Genes & Development 期刊的论文,来自施一公团队,用最基础的细胞凋亡机制研究,收获 IF 11.361 的高分。
这样看来,小小的细胞实验是非常有潜力的。但不管是做细胞机制还是细胞凋亡实验,都离不开最基础的细胞培养和基础实验方法。
如果你正在做细胞实验或即将开展基础科研,建议大家订阅收藏细胞专题👇


一起看看专题页内,有哪些内容吧!

实验前先把细胞养壮

想要养出「可爱皮实又稳定」的细胞,总共分几步?丁香实验给大家共同整理了一份史上「细胞培养大全教程」,让大家快速掌握细胞培养技术要点:
唤醒你的细胞
大多数实验使用细胞系,因此正确操作细胞复苏 很重要,细胞复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。
壮大细胞团队
贴壁细胞的换液、传代,都是细胞培养中的基础操作,严格进行无菌操作,细胞培养皿上应清楚标记操作人、时间、细胞系。
冻存多余细胞
细胞生长至对数中晚期,以培养基制备高浓度细胞悬液,加入细胞保护剂,等份转移至冻存管中做好细胞冻存保种,保证后续实验可以顺利进行。

9 个细胞实验务必掌握
搞定细胞培养后,第二件事就是——做正经实验了。以下都是非常基础的细胞入门级实验,现已收录在丁香实验「细胞常用实验专题」内。
>>> 细胞划痕实验
细胞划痕 (wound healing)法是简捷测定细胞迁移运动和修复能力的方法,类似体外伤口愈合模型。

>>> 细胞毒性分析
细胞毒性是指由细胞或化学物质引起的单纯细胞杀伤事件,不依赖于凋亡或坏死的细胞死亡机理。常用细胞毒性检测方法有 CCK-8 法、MMT 法。
>>> 细胞增殖分析
CCK-8、MMT  也可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析,以下是两种试剂利弊分析。


>>> 细胞 RNA 提取实验
通过加入Trizol,能破坏细胞和溶解细胞成分,利用氯仿的萃取得到上层水相(含RNA)、界面层和下层的红色有机相(含DNA和蛋白)。
得到的水层用异丙醇沉淀并经过酒精的洗涤去除杂质,能分离大小不一的各种RNA,可以用来做 细胞RT-PCR、分子克隆、Northern-Blot、RNA 体外转录与翻译等实验。
>>> 细胞蛋白质提取实验
细胞蛋白的提取是生物学实验中一种常见的实验方法,是很多其他生物学实验的前提。
通过加入裂解缓冲溶液以及相应的蛋白酶抑制剂,能较好的保持细胞内生物大分子的天然状态,在透膜剂以及超声破碎仪的辅助下,细胞将发生破裂,内容物释放出来。
>>> 细胞 ROS 实验
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)是超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等总称。
参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程,与多种神经退行性疾病相关,如阿兹海默症、帕金森症等,通过检测 ROS 水平,可以评估疾病模型是否建立成功,亦可作为药效评价指标。
>>> 细胞免疫化学 & 细胞免疫荧光
免疫细胞化学与免疫细胞荧光两者实现的实验目的相似,可以从形态角度检测特定蛋白含量变化,但各有优缺点。

>>> 细胞免疫蛋白共沉淀
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是一种利用抗原与抗体之间的专一性为基础,广泛应用于研究蛋白质与蛋白质相互作用的经典研究方法。

>>> 细胞转染和分析(稳转;瞬转)
细胞转染是指将外源分子如 DNA RNA 等导入真核细胞的技术。可以分为瞬时转染和稳定转染,两种方法的优缺点比较如下:

以上就是细胞培养以及常用的 9 个实验,在以上内容全都掌握了以后,成熟运用,就能做出你想要的研究。
最后,除了基础方法以外,科研思路也很重要,推荐一些期刊,大家在练技术的同时也可以学习学习「套路」:
  • Cell Death & Disease:肿瘤、干细胞、细胞死亡、审稿周期 2 个月,IF=6.28
  • JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR MEDICINE:肿瘤、心血管、基础医学方向,审稿周期 3 个月,IF=4.829
  • Cell Reports,综合期刊,覆盖医学、药学,审稿周期 1.9 个月,IF=8.695

以上就是细胞培养、实验操作指南指导合集,如果你是实验小白可以收藏、转发文章,在做实验的时候按照流程一步步操作。如果你是师兄师姐,也可以把本篇文章分享给师弟师妹们!

参考文献:

Quantitative proteomics reveals that long non-coding RNA MALAT1 interacts with DBC1 to regulate p53 acetylation. Nucleic Acids Res. 2017 Sep 29;45(17):9947-9959.


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编辑: 王凯

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